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UVP质粒凝胶定量分析
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我们实验室的凝胶成像分析系统用的UVP的，每次跑完电泳，师兄师姐都用肉眼对比一下亮度，通过Marker判断质粒有多少ng。我觉得肉眼判断不准，想通过UVP自带的软件分析得到结果，于是自己研究了下。 我的marker是TaKaRa公司的Supercoiled DNA Ladder Marker。通过肉眼判断，我的质粒条带的亮度与marker中最亮的5kbp的条带相同，即150ng。用软件得到的浓度却是50ng。不知道为什么是这个结果。 可能是我用软件用的不对？我们通常不都是看有多少ng吗？软件的定量里用的是浓度，那应该怎么输入和计算啊？直接按ng输，得到的结果也认为是多少ng不行吗？ 还有就是北京校正，好像是有好几种方式，比如Rolling Disc,让输入数值，我输了6，这时峰比较尖锐，我也不懂，以为这种情况比较好，应该怎么样设数值啊？是不是这个问题也影响了实验结果啊？ 希望高人不吝赐教，不胜感激！或者相关的中文教程的资源，能够提供一下？谢谢！ |
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