应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 引物设计时酶切位点的添加。
51/1返回列表
查看: 2768  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

flwilliam

银虫 (小有名气)

[求助] 引物设计时酶切位点的添加。

请教下各位，在引物设计时如果直接在5段加上酶切位点，那么这个引物的相关评估会改变么？还可以用PP5对添加了酶切位点的引物进行评估么？
我是个新手，望各位不吝赐教。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-05 13:33:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小科研女dow

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-06 02:12:04
flwilliam: 金币+5 2013-10-06 13:40:20
其实引物的设计没有想象的呃那么麻烦，你用PP证明酶切位点你的序列里没有就可以了，设计的时候保护碱基也按照提示的加就可以了，如果想检测，测一下CG含量不高于70%就不会有问题了，实践是真理，自己P一下，看结果就一目了然了。祝顺利。
赞一下(3人) 回复此楼
做出色的科研人
2楼2013-10-05 14:10:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peng~yu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我之前帮别人设计过带有酶切位点的引物，首先要先设计与模板进行完全退火互补的引物，合成出来以后用这个引物与模板一起做PCR，如果是产生单一条带的话就直接在5'末端加酶切位点和保护碱基就好了，设计出来的长引物能不能扩出来的很重要的一点是之前的短引物能不能扩出来，当然在长引物设计好了之后也需要用引物设计软件看一下引物的二级结构，其实很简单的。另外长引物做PCR的条件跟之前的短引物是一样的。希望可以帮助到你！
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-10-06 10:48:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flwilliam

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小科研女dow at 2013-10-05 14:10:52
其实引物的设计没有想象的呃那么麻烦，你用PP证明酶切位点你的序列里没有就可以了，设计的时候保护碱基也按照提示的加就可以了，如果想检测，测一下CG含量不高于70%就不会有问题了，实践是真理，自己P一下，看结果就 ...

谢谢了。。
回复此楼
4楼2013-10-06 13:39:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flwilliam

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by peng~yu at 2013-10-06 10:48:27
我之前帮别人设计过带有酶切位点的引物，首先要先设计与模板进行完全退火互补的引物，合成出来以后用这个引物与模板一起做PCR，如果是产生单一条带的话就直接在5'末端加酶切位点和保护碱基就好了，设计出来的长引物 ...

多谢指教。。
回复此楼
5楼2013-10-06 13:40:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 flwilliam 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 6/300 2026-09-30 16:26 by Z9YWQ5EAO3qp
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 6/300 2026-09-30 16:14 by Z9YWQ5EAO3qp
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +10 zju2000 2026-09-26 13/650 2026-09-30 10:26 by yexuqing
[有机交流] 同一个分子，一条来自文献，一条来自AI——不告诉你答案，你会选哪条？ +4 tianxiaoxian 2026-09-28 7/350 2026-09-30 08:34 by 88817753
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭