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mfyzys

银虫 (小有名气)

[求助] western blot

notch1胞内段NICD,我用western做一个多月了,还没有出来,我用全心肌组织BCA法提取蛋白,5ug/ml,上样量60ug,一抗兔单克隆抗体,二抗山羊抗小鼠iga,一抗浓度说明书建议1:1000,我试调到1:100,还没有出来,还有说明建议NICD分子量为110kd,但有文献是做小鼠,分子量为85kd,我按照两个分子量都没有做出来,请高手指教,非常感谢!
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在学习中成长
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-09-29 10:14:00
一抗是兔单克隆抗体,二抗应该选抗兔的,不能用抗鼠的。

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2楼2013-09-29 08:50:33
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ferments

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-30 21:40:47
这个  你二抗选错了   顶二楼
3楼2013-09-29 09:26:05
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moshangchenx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-09-30 21:40:56
一抗是什么种属,二抗就抗什么
科研无止境,我心成蹉跎
4楼2013-09-30 19:12:33
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DAX1

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by moshangchenx at 2013-09-30 19:12:33
一抗是什么种属,二抗就抗什么

我也真心给跪了,你们实验室没有老板或者师兄可以指导下你啊。你的一二抗是怎么用的啊。我宁愿相信楼主是打字时候失误了
5楼2013-09-30 19:52:28
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DAX1

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by moshangchenx at 2013-09-30 19:12:33
一抗是什么种属,二抗就抗什么

不好意思,引用错误啊
6楼2013-09-30 19:55:23
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feilinshiji

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-10-01 01:36:19
大哥,一抗二抗不匹配啊。一抗是什么动物源的,二抗就必然是抗什么动物的,你的一抗是兔源的,二抗必须是抗兔源Ig的
7楼2013-10-01 00:48:43
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mfyzys

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-29 08:50:33
一抗是兔单克隆抗体,二抗应该选抗兔的,不能用抗鼠的。

我写错了,二抗是抗兔的。
在学习中成长
8楼2013-10-01 19:51:41
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mfyzys

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ferments at 2013-09-29 09:26:05
这个  你二抗选错了   顶二楼

不好意思,二抗写错了,这是内参actin的二抗
在学习中成长
9楼2013-10-01 19:55:41
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mfyzys

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by moshangchenx at 2013-09-30 19:12:33
一抗是什么种属,二抗就抗什么

不好意思,二抗写错了,这是内参actin的二抗
在学习中成长
10楼2013-10-01 19:55:58
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