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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 相对定量PCR内参的实际操作
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轻风伊始

新虫 (小有名气)

[求助] 相对定量PCR内参的实际操作

大师们好：
    小妹初次接触定量PCR,打算做相对定量：10个模板（不同处理），10个基因。每一版（96孔）我做8个模版的话是不是每个模版都要加内参？？？可不可以一次性先用10个模版先跑内参，然后再跑基因呀？？（注：内参与待测基因的退火温度不一致）
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1楼 2013-09-06 16:18:04
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guxinhan123

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-07 00:27:01
要同时跑内参和待测基因，先用内参和待测基因做标准曲线，看扩增效率是否一致，差很多就不能用比较ct法。重设引物，使内参和目的基因的退火温度相近
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2楼2013-09-06 19:38:11
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yanshuai511

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人觉得每块板子上，最好是每个样本还是要有内参和目的基因的。同样的样本，不同的板子跑，内参还是会有点儿不一样的。
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3楼2013-09-08 14:03:32
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