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lzk871123

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于荧光定量PCR，我很着急，请大家帮帮我，谢谢！~

问一下大家用荧光定量pcr来测定某基因的表达规律，那这个测出来的表达量是该基因的瞬时表达量呢还是累积表达量啊？
举个例子：假如我要研究套袋苹果在解袋之后PAL基因的表达规律，我该怎么取样呢？是全部解袋然后在解袋后3,6,9,11天........依次取样还是说分3,6,9,11天.....依次去解袋然后最后一天统一采收所有样品呢？这2种取样方案那种对啊？我在线急等，请大家一定帮帮我，谢谢了
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1楼 2013-09-01 09:57:11
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hyc_charles

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-14 10:06:46
LZ别着急，我跟你专业方向不同，我是做RT-PCR，过不一般我们都用相对定量，找一个合适的内参来计算基因的相对表达量，如果你采取这种方法，我倒是可以跟你讨论讨论……
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不但要做一个优秀的人，更要做一个无可取代的人…
2楼2013-10-14 09:55:32
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taccycle

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我觉得你应该用第一种设计，但是要改进一下，就是不能全部解袋，要留一部分没有解袋的，第三天的时候对解袋三天的苹果和没有解袋同样放了三天的苹果分别取样，第6天的时候对解开袋子6天的苹果和没有解袋同样放了6天的结果分别取样，按照这样的方法取样。因为苹果不解袋的时候其PAL基因的表达可能也在随时间变化，所以你需要每次采样采一对样本，一个解袋一个不解袋，但都放置了同样的时间，这样就可以消除时间的影响而只研究解袋的影响
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用心
3楼2013-10-16 17:24:49
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