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zqxy1223

铁虫 (初入文坛)

[求助] 想请教一下做RACE时,特异性引物的设计问题,以及如何根据同源保守区设计引物?

我是一个做分子生物学的新手,老师也没太多时间知道,所以的问题都要靠自己摸索。所以我的问题在您看来若很弱智,请您耐心的解答,非常感谢。
    我想在利用RACE方法做植物上一个基因的全长,根据同源克隆法,利用DNAMAN比对序列后,如何选取保守区,选择保守区序列的位置和原则是什么?又如何根据保守区设计3‘引物和5’引物?还是先做3‘race,根据pcr产物再做5’race?非常感谢。
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核酸生物学实验经验 RACE

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暗星

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我觉得先根据其他物种基因的保守区设计兼并引物,在你做的物种上扩兼并引物之间的序列
然后根据测得本物种的序列设计特异引物,先做3‘
最后做5’
浅显的意见!
10楼2013-08-25 11:10:19
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