应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达载体目的片段终止密码子后出现ATG
汕头大学海洋科学接受调剂
131/1返回列表
查看: 3998  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yangjianchen

铜虫 (小有名气)

[交流] 原核表达载体目的片段终止密码子后出现ATG

在构建原核表达载体时扩增获得的片段有完整的编码框，但是由于引物设计的原因在连入载体的片段TGA（end codon）后不远处出现了ATG，请问这个ATG是否会对原核表达载体的表达产生影响？它会成为一个新的起始密码子对其后面的序列进行转录翻译表达吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-08-21 09:01:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

roomofxw

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-08-21 10:32:46
一般不会，除非中间再出现RBS，TATA框等类似结构
赞一下 回复此楼
2楼2013-08-21 09:03:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-08-21 10:32:54
在终止密码子后面出现ATG不是什么问题。
赞一下 回复此楼
3楼2013-08-21 09:17:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
yangjianchen: 金币+3, 很感谢！ 2013-08-22 09:25:09
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-08-23 11:43:31
可能会有产物。因为原核表达载体往往是用强启动子，在没有终止子序列的情况下，终止密码子不足以使核糖体脱落。不过，在终止密码子后面的产物不会与目标基因的产物合并，所以对目标基因的表达影响不大。
赞一下 回复此楼
4楼2013-08-21 11:07:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘性大啊

新虫 (初入文坛)
无影响
回复此楼
5楼2013-08-21 11:28:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjianchen

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-21 11:07:49
可能会有产物。因为原核表达载体往往是用强启动子，在没有终止子序列的情况下，终止密码子不足以使核糖体脱落。不过，在终止密码子后面的产物不会与目标基因的产物合并，所以对目标基因的表达影响不大。

谢谢啊！我觉得还是考虑不连后面的非编码区了，但是前面想扩增到TGA不容易啊，高GC。。。
赞一下 回复此楼
6楼2013-08-22 09:24:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
yangjianchen: 金币+1 2013-08-23 09:48:58
引用回帖:
6楼: Originally posted by yangjianchen at 2013-08-22 09:24:58
谢谢啊！我觉得还是考虑不连后面的非编码区了，但是前面想扩增到TGA不容易啊，高GC。。。...

如果后面有ATG，但序列不长应该没事的。
赞一下 回复此楼
7楼2013-08-22 22:33:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)
★
yangjianchen: 金币+1 2013-08-23 09:47:53
有可能出现通读的情况。
赞一下 回复此楼
8楼2013-08-22 23:17:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjianchen

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 547star at 2013-08-22 23:17:20
有可能出现通读的情况。

通读是什么意思？我的意思是这个ATG之前有TGA，难道之前的这个TGA不会终止编码吗？
赞一下 回复此楼
9楼2013-08-23 09:48:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjianchen

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-22 22:33:53
如果后面有ATG，但序列不长应该没事的。...

恩，先尝试下，尽量把后面舍弃掉。。。谢谢
赞一下 回复此楼
10楼2013-08-23 09:49:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huoyongting

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果ATG离TGA很近，然后ATG后面的编码框比较长，会有些问题的，我以前碰到过几次重新起始的
赞一下 回复此楼
11楼2013-08-23 17:25:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuahan

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，我也在做原核表达载体构建，是个新手，有个问题想请教一下，我现在有目的基因的CDS序列，在设计引物的时候是应该根据目的基因的CDS序列还是ORF序列尼？如果是用ORF的话，我分析了一下CDS序列中有5段ORF，是选取一段ORF还是5段ORF片段尼？如果是5段都用的话，那每段中的终止密码子会不会影响后期蛋白的表达？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
12楼2014-05-04 10:27:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我又当如何

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-21 11:07:49
可能会有产物。因为原核表达载体往往是用强启动子，在没有终止子序列的情况下，终止密码子不足以使核糖体脱落。不过，在终止密码子后面的产物不会与目标基因的产物合并，所以对目标基因的表达影响不大。

你说的很不清楚，强启动子是指他的转录能力很强，这能跟终止密码子使核糖体脱不脱落有关吗
赞一下 回复此楼
13楼2018-02-01 15:11:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yangjianchen 的主题更新
131/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求助调剂，跨调 +13 X十甫寸Y 2026-04-11 14/700 2026-04-13 22:21 by zhq0425
[考研] 085600材料与化工，求调剂 +14 won_qii 2026-04-07 14/700 2026-04-13 22:21 by pies112
[考研] 求调剂 +11 璃茉一定上岸 2026-04-10 12/600 2026-04-13 22:20 by zhq0425
[考研] 各位老师好，求调剂，本科211，一志愿天津大学生物与医药学硕，差两名录取。 +8 路六六jjj 2026-04-13 8/400 2026-04-13 20:42 by paopaotu326
[考研] 一志愿沪9，326求生物学调剂 +9 刘墨墨 2026-04-13 9/450 2026-04-13 18:59 by lbsjt
[考研] 310求调剂 +14 666真好 2026-04-11 16/800 2026-04-13 16:44 by 89436494
[考研] 材料复试求调剂 +24 xhhdjdjsjks 2026-04-09 24/1200 2026-04-13 15:49 by 幸免 ..
[考研] 303求调剂 +14 SereinQ 2026-04-10 15/750 2026-04-11 20:43 by 蓝云思雨
[考研] 284求调剂 +11 archer.. 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:23 by 蓝云思雨
[考研] 275求调剂 +9 1624447980 2026-04-08 10/500 2026-04-11 10:20 by Delta2012
[考研] 311求调剂 +13 xyp想读书 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:41 by 猪会飞
[考研] 22408调剂求助 +7 毂12 2026-04-09 9/450 2026-04-11 09:23 by 哦哦123
[考研] 085506-求调剂-285分 +3 雷欧飞踢 2026-04-08 3/150 2026-04-11 08:37 by zhq0425
[考研] 材料与化工调剂 +12 否极泰来2026 2026-04-10 13/650 2026-04-11 00:28 by wangjihu
[论文投稿] mdpi小修rvr时间四五天了 20+3 哈哈high 2026-04-08 5/250 2026-04-10 16:02 by 北京莱茵润色
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 086004 求调剂 309 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 13:59 by Delta2012
[考研] 334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 09:28 by wdyheheeh
[考研] 专硕085403，291分，有两篇专利，一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
[考研] 软工学硕299求调剂 +6 useryy 2026-04-07 6/300 2026-04-07 09:50 by vgtyfty
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭