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jxm520zyc

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[求助] western blot 内参β-actin图片异常

western blot 内参条带出现双带，求大神指点~

2013-08-20 β-actin.jpg

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学习中~

1楼 2013-08-20 16:04:49

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qingyuansw20

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【答案】应助回帖

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jxm520zyc: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-08-24 12:03:49
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-25 01:55:12
gyesang: 回帖置顶 2013-08-25 01:55:14

1、现象：出现多条带，通常称为出现了非特异性条带（非你想要的条带，带想要的条带也出现。即1抗与杂蛋白接触了。）。
2、原因：非特异性条带的产生通常是因为1抗的原因，多克隆抗体经常会出现非特异性条带，单克隆抗体就基本不会出现。通常原因就是1抗浓度过高。
3、解决办法：换较大梳子，增加蛋白上样量，降低1抗浓度（按说明书两头及中间摸索浓度）。
4、补充：内参的特异性不影响发表论文和答辩。但目的蛋白要是出现双条明显带你就要解释清楚了。