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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 我为什么最近提取真菌的基因组DNA总是提取不出
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jjssfan

新虫 (小有名气)

[交流] 我为什么最近提取真菌的基因组DNA总是提取不出

我为什么最近提取真菌的基因组DNA总是提取不出来，用试剂盒，生工的，没加蛋白酶K，ＲＮＡ酶。。。。帮我看看原因，提提意见。。。下面是几次电泳图
我为什么最近提取真菌的基因组DNA总是提取不出
yuanwei 2013-08-18 21hr 09min.jpg
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1楼 2013-08-18 22:12:49
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Fleaves

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
jjssfan: 金币+2, 我用sds，就是没有用蛋白酶k 2013-08-24 12:42:47
你用CTAB提一下试试
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6楼2013-08-19 10:33:14
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普通回帖

jjssfan

新虫 (小有名气)
那个２,３是我的样品，２,３白色的是什么，我之前也有提取基因组DNA再pcr也没有出现目的条带，，，5000marker
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2楼2013-08-18 22:14:31
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cisong

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
真菌破壁是不是要用溶壁酶？
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3楼2013-08-18 23:44:03
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Sthunder

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by jjssfan at 2013-08-18 22:14:31
那个２,３是我的样品，２,３白色的是什么，我之前也有提取基因组DNA再pcr也没有出现目的条带，，，5000marker

一片白色是降解后的RNA！
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4楼2013-08-19 07:12:31
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wzwhq

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-08-22 18:30:00
真菌壁厚，你应该加溶菌酶反应15-30分钟，然后再按照正常步骤提，以前我们提革兰氏阳性菌的时候都是这样提的
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5楼2013-08-19 09:42:07
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jjssfan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wzwhq at 2013-08-19 09:42:07
真菌壁厚，你应该加溶菌酶反应15-30分钟，然后再按照正常步骤提，以前我们提革兰氏阳性菌的时候都是这样提的

真菌用溶菌酶没有，应该是用液氮或者石音沙研磨破壁

[ 发自小木虫客户端 ]
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7楼2013-08-19 11:04:20
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yuehongshan

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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jjssfan: 金币+3, 谢谢我用试剂盒 2013-08-24 12:42:03
我们是用液氮加CTAB提的
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8楼2013-08-20 09:12:34
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jjssfan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Fleaves at 2013-08-19 10:33:14
你用CTAB提一下试试

我又没有由可能没有提取出DNA来
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9楼2013-08-24 12:43:18
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张小逸

铜虫 (小有名气)
★
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你用的植物基因组DNA提取试剂盒还是？
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10楼2013-10-25 11:01:23
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mengtaji

木虫 (小有名气)
★
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我们一般提取真菌DNA，首先要用液氮多研磨几次，，一般是三次，以确保研磨充分，我们用的也是生工的试剂盒，效果还可以的，还有就是研磨过后不要加入太多的粉末，不必要加50毫克，然后就差不多了，我每次提都不称的，愿好
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11楼2013-10-26 13:00:30
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