24小时热门版块排行榜

返回列表

yuezhixian

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 146.5
帖子: 43
在线: 15.8小时
虫号: 1125811

[交流] 【求助】石蜡组织标本中提取DNA方法

最近按照试剂盒中步骤提取石蜡组织中的DNA，但一直提不出。觉得问题应该出在脱蜡步骤上。
请问大虾们，用二甲苯脱蜡应该注意什么？如何判断石蜡已经脱干净，可以进行无水乙醇洗涤了？乙醇洗涤后时候可以直接消化？还是在消化前需要其他步骤？

关键时刻请拉战友一把，感激不尽！

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

请问大家，提取DNA时液氮研磨组织或植物叶片的作用是什么？已经有10人回复
丹参DNA提取已经有9人回复
DNA的提取简介，包括法医DNA的提取方法！已经有54人回复
大家都用什么方法提取植物DNA 已经有19人回复
为什么提取的DNA总是降解？已经有41人回复
【求助/交流】CTAB法提取了dna，帮我看看图片，帮忙提点改进方法已经有20人回复
【求助/交流】求动物组织DNA提取方法已经有8人回复
【求助/交流】真菌提取基因组DNA的方法已经有7人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2011-04-14 23:19:48

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

holyala

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
yuezhixian(金币+5): 灰常感谢！ 2011-04-15 17:10:26
lstt09nk(金币+6): 辛苦 2011-05-14 09:28:53

呃...LZ你做的是石蜡块，还是石蜡切片提取DNA？
有条件的话，我建议做成10~15um的石蜡切片后再提取，这样效果较好。如果是石蜡块且形状较大，那么脱蜡时间要相应延长，最好能够50℃温育半小时左右。
至于如何判断石蜡是否已经除净...这个，我没什么好办法，就是肉眼观察。不过我通常是用二甲苯重复处理两次，之后再用乙醇清洗。
乙醇清洗完之后自然干燥，如果是切片的话就可以直接裂解液消化了，如果是较大的组织块，需要加入裂解液后用匀浆器打碎，之后再恒温孵育若干时间。
最后提一点，二甲苯有毒，如果需要经常提取的话，建议用右旋柠檬烯（D-limonene）代替，效果很好，气味芳香，无毒无害~