应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】石蜡组织标本中提取DNA方法
51/1返回列表
查看: 2087  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yuezhixian

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】石蜡组织标本中提取DNA方法

最近按照试剂盒中步骤提取石蜡组织中的DNA，但一直提不出。觉得问题应该出在脱蜡步骤上。
请问大虾们，用二甲苯脱蜡应该注意什么？如何判断石蜡已经脱干净，可以进行无水乙醇洗涤了？乙醇洗涤后时候可以直接消化？还是在消化前需要其他步骤？

关键时刻请拉战友一把，感激不尽！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-04-14 23:19:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

holyala

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
yuezhixian(金币+5): 灰常感谢！ 2011-04-15 17:10:26
lstt09nk(金币+6): 辛苦 2011-05-14 09:28:53
呃...LZ你做的是石蜡块，还是石蜡切片提取DNA？
有条件的话，我建议做成10~15um的石蜡切片后再提取，这样效果较好。如果是石蜡块且形状较大，那么脱蜡时间要相应延长，最好能够50℃温育半小时左右。
至于如何判断石蜡是否已经除净...这个，我没什么好办法，就是肉眼观察。不过我通常是用二甲苯重复处理两次，之后再用乙醇清洗。
乙醇清洗完之后自然干燥，如果是切片的话就可以直接裂解液消化了，如果是较大的组织块，需要加入裂解液后用匀浆器打碎，之后再恒温孵育若干时间。
最后提一点，二甲苯有毒，如果需要经常提取的话，建议用右旋柠檬烯（D-limonene）代替，效果很好，气味芳香，无毒无害~

[ Last edited by holyala on 2011-4-15 at 10:07 ]
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-04-15 10:04:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangsener032

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-05-14 09:30:37
额。。。。。。
石蜡组织中的组织块是经过甲醛浸泡处理过的吧？貌似甲醛会破坏DNA，所以少有提得出来的呢。我有一个同学做的就是这个相关的。不过我不是很清楚这些之间有没有必然的联系。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-04-17 09:29:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skywalkerelf

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
Qiagen有一款试剂盒可以提取蜡块组织的DNA，试试吧，我们这有人用！还不错的说哦！
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-05-13 14:52:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Explor

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
BIOG石蜡包埋组织DNA抽提试剂盒无需过夜温育即可从福尔马林固定的、石蜡包埋组织中高效纯化基因组DNA，可以一试。
赞一下 回复此楼
5楼2019-12-06 10:48:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuezhixian 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 11:09 by lqtl9djx19
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:54 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:39 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:53 by lqtl9djx19
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:38 by lqtl9djx19
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 07:55 by lotyj5cz79
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:40 by lotyj5cz79
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:38 by lotyj5cz79
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:23 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:08 by lotyj5cz79
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 3/150 2026-02-18 06:53 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 00:40 by tk2gfblvuz
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 00:23 by tk2gfblvuz
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-17 23:40 by tk2gfblvuz
[基金申请] 基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书 +3 successhe 2026-02-16 4/200 2026-02-17 20:56 by successhe
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错，点赞！ +5 瞬息宇宙 2026-02-16 6/300 2026-02-17 12:49 by jymy19840415
[微米和纳米] 球磨粉体时遇到了大的问题，请指教！ 10+3 6sbiam 2026-02-12 15/750 2026-02-16 15:03 by tgzxzqj
[基金申请] 过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链 +3 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-16 14:23 by aspect3000
[基金申请] 情人节自我反思：在爱情中有过遗憾吗？ +4 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-15 22:28 by baiboxie
[硕博家园] 江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后 +3 cleverlyy 2026-02-12 3/150 2026-02-12 21:02 by qsdf1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭