应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达诱导蛋白
51/1返回列表
查看: 1543  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

科技广场

铜虫 (小有名气)

[求助] 原核表达诱导蛋白

请问大家原核表达诱导蛋白时用的IPTG浓度是多少？，跑SDS-PAGE电泳的时候，菌体破碎后上清跟菌体分开分别上样吗？谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-07-24 11:22:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科技广场

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by alicelchf at 2013-07-24 11:59:27
37度 3-4小时诱导，可以1mM，这样表达会快点，但是前提是你的蛋白不是说很么特殊的蛋白
16度过夜的话，一般都是0.5mM以下了，因为要温和诱导。
iptg过量会影响你的蛋白表达，有时候还会抑制，所以要慎用！

跑S ...

可是菌体破碎后，离心后上清跟菌体分不大开
赞一下 回复此楼
5楼2013-07-25 10:35:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-24 12:09:11
科技广场: 金币+8, ★★★很有帮助 2013-07-25 10:32:53
37度 3-4小时诱导，可以1mM，这样表达会快点，但是前提是你的蛋白不是说很么特殊的蛋白
16度过夜的话，一般都是0.5mM以下了，因为要温和诱导。
iptg过量会影响你的蛋白表达，有时候还会抑制，所以要慎用！

跑SDS-PAGE电泳的时候，菌体破碎后上清跟菌体分开分别上样，因为这是判断你的蛋白是否可溶的标准，所以需要的。
赞一下(1人) 回复此楼
修身、齐家、治国、平天下
2楼2013-07-24 11:59:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuzhicheng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
科技广场: 金币+2, ★有帮助 2013-07-25 10:33:06
自己做个IPTG浓度梯度 一般IPTG终浓度0.01mmol/L、0.05mmol/L、0.1mmol/L、0.5mmol/L 。包括诱导温度和诱导时间都要自己摸索一下，最合适的表达条件才拿到更多的重组蛋白。
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-24 14:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
2楼、3楼正解，祝楼主顺利啊，呵呵
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-24 16:29:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭