24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1654  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

科技广场

铜虫 (小有名气)

[求助] 原核表达诱导蛋白

请问大家原核表达诱导蛋白时用的IPTG浓度是多少?,跑SDS-PAGE电泳的时候,菌体破碎后上清跟菌体分开分别上样吗?谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科技广场

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by alicelchf at 2013-07-24 11:59:27
37度 3-4小时诱导,可以1mM,这样表达会快点,但是前提是你的蛋白不是说很么特殊的蛋白
16度过夜的话,一般都是0.5mM以下了,因为要温和诱导。
iptg过量会影响你的蛋白表达,有时候还会抑制,所以要慎用!

跑S ...

可是菌体破碎后,离心后上清跟菌体分不大开
5楼2013-07-25 10:35:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-24 12:09:11
科技广场: 金币+8, ★★★很有帮助 2013-07-25 10:32:53
37度 3-4小时诱导,可以1mM,这样表达会快点,但是前提是你的蛋白不是说很么特殊的蛋白
16度过夜的话,一般都是0.5mM以下了,因为要温和诱导。
iptg过量会影响你的蛋白表达,有时候还会抑制,所以要慎用!

跑SDS-PAGE电泳的时候,菌体破碎后上清跟菌体分开分别上样,因为这是判断你的蛋白是否可溶的标准,所以需要的。
修身、齐家、治国、平天下
2楼2013-07-24 11:59:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuzhicheng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
科技广场: 金币+2, 有帮助 2013-07-25 10:33:06
自己做个IPTG浓度梯度 一般IPTG终浓度0.01mmol/L、0.05mmol/L、0.1mmol/L、0.5mmol/L 。包括诱导温度和诱导时间都要自己摸索一下,最合适的表达条件才拿到更多的重组蛋白。
3楼2013-07-24 14:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
2楼、3楼正解,祝楼主顺利啊,呵呵
4楼2013-07-24 16:29:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 抱歉 +5 田洪有 2026-03-30 5/250 2026-04-03 10:24 by linyelide
[考研] 311求调剂一志愿合肥工业大学 +15 秋二十二 2026-03-30 15/750 2026-04-03 10:19 by linyelide
[考研] 279求调剂 +6 qazplm0852 2026-04-02 6/300 2026-04-03 10:03 by 蓝云思雨
[考研] 材料考研调剂 +10 Gs大王 2026-04-02 10/500 2026-04-03 09:47 by 遗忘消失的灆
[考研] 材料调剂 +7 一样YWY 2026-04-02 7/350 2026-04-02 21:49 by dongzh2009
[考研] 372分材料与化工(085600)一志愿湖南大学求调剂 +5 蓝笺片 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:37 by dongzh2009
[考研] 08工科求调剂290分 +5 1314捧花 2026-04-02 8/400 2026-04-02 13:16 by 乔哒哒哒
[考研] 求调剂推荐 +3 南山南@ 2026-04-01 3/150 2026-04-02 12:09 by xiaoranmu
[考研] 289求调剂 +23 新时代材料 2026-03-27 26/1300 2026-04-02 10:29 by oooqiao
[考研] 311求调剂 +16 zchqwer 2026-04-01 18/900 2026-04-02 10:15 by 不吃魚的貓
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-01 12/600 2026-04-02 00:21 by 百秒光年
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 22:25 by zhouyuwinner
[考研] 086000生物与医药 初试274求调剂 +5 小叮当来了 2026-03-30 6/300 2026-04-01 14:25 by mxj1203
[考研] 合肥区域性重点一本招收调剂 +4 6266jl 2026-03-30 8/400 2026-03-31 18:43 by 6266jl
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +11 萝卜炖青菜 2026-03-28 12/600 2026-03-31 17:54 by xhai2011
[考研] 085601英二数二求调剂 总分325 +4 余航航 2026-03-31 4/200 2026-03-31 17:38 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 生物学 377分 +6 zzll03 2026-03-31 6/300 2026-03-31 17:33 by 唐沐儿
[考研] 277跪求调剂 +8 1915668 2026-03-27 13/650 2026-03-31 14:58 by 王亮_大连医科大
[考研] 本科211生物医学工程085409求调剂339分 +7 里子木yy 2026-03-29 7/350 2026-03-31 14:35 by fmesaito
[考研] 调剂求院校招收 +7 鹤鲸鸽 2026-03-28 7/350 2026-03-31 11:21 by oooqiao
信息提示
请填处理意见