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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 毕赤酵母表达蛋白纯化
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梦中江楼

新虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母表达蛋白纯化

本人刚开始做实验，毕赤酵母用甲醇诱导表达的蛋白在培养基中，应该怎样提纯，蛋白加了His-tag标签，用镍和层析怎样处理培养基？求镍和层析的具体纯化步骤。
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1楼 2013-07-21 09:12:48
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高大上小天鹅

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2013-07-23 07:54:56
既然是分泌在培养基中，先过个超滤膜，把蛋白浓缩下，然后溶解在上样缓冲液中，上镍亲和柱，后面的方法就和普通的镍柱亲和层析一样了。

你好，我现在遇到的问题是离心后，含有分泌蛋白的上清颜色很黄，过超滤膜容易把膜堵上，你的颜色黄吗？
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11楼2016-02-28 09:28:18
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