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雨璐花香

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR的时候P出了好几个条带是什么原因

目标条带是1300bp的条带，结果P的时候多了好几条几百的条带，是什么原因啊？因为菌不纯吗？
PCR的时候P出了好几个条带是什么原因
07-19PCR.jpg
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1楼 2013-07-19 21:03:43
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
雨璐花香: 金币+3, ★有帮助 2013-07-20 10:48:33
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-07-21 12:32:05
模板是什么？做的是菌落PCR还是提出DNA后P的？最下面明显是引物二聚体。中间比较暗的可能是非特异扩增，引物的退火温度优化过吗？
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2楼2013-07-20 02:27:46
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雨璐花香

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-20 02:27:46
模板是什么？做的是菌落PCR还是提出DNA后P的？最下面明显是引物二聚体。中间比较暗的可能是非特异扩增，引物的退火温度优化过吗？

这个图就是退火温度做的梯度，总共4个样，五个梯度，前五个是一个样，后面依次是这样
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3楼2013-07-20 08:47:01
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雨璐花香

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-20 02:27:46
模板是什么？做的是菌落PCR还是提出DNA后P的？最下面明显是引物二聚体。中间比较暗的可能是非特异扩增，引物的退火温度优化过吗？

是提DNA之后P的
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4楼2013-07-20 10:48:23
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zhang1zheng2

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
2楼是正解
你这个实验设计负对照了么？
对比下可以看出哪些条带是你要的，哪些不是。
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手握日月摘星辰，看透生死破凡尘
5楼2013-07-20 16:26:31
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