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雨璐花香

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR的时候P出了好几个条带是什么原因

目标条带是1300bp的条带,结果P的时候多了好几条几百的条带,是什么原因啊?因为菌不纯吗?
PCR的时候P出了好几个条带是什么原因
07-19PCR.jpg
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
雨璐花香: 金币+3, 有帮助 2013-07-20 10:48:33
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励交流! 2013-07-21 12:32:05
模板是什么?做的是菌落PCR还是提出DNA后P的?最下面明显是引物二聚体。中间比较暗的可能是非特异扩增,引物的退火温度优化过吗?
2楼2013-07-20 02:27:46
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雨璐花香

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-20 02:27:46
模板是什么?做的是菌落PCR还是提出DNA后P的?最下面明显是引物二聚体。中间比较暗的可能是非特异扩增,引物的退火温度优化过吗?

这个图就是退火温度做的梯度,总共4个样,五个梯度,前五个是一个样,后面依次是这样
3楼2013-07-20 08:47:01
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雨璐花香

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-20 02:27:46
模板是什么?做的是菌落PCR还是提出DNA后P的?最下面明显是引物二聚体。中间比较暗的可能是非特异扩增,引物的退火温度优化过吗?

是提DNA之后P的
4楼2013-07-20 10:48:23
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zhang1zheng2

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
2楼是正解
你这个实验设计负对照了么?
对比下可以看出哪些条带是你要的,哪些不是。
手握日月摘星辰,看透生死破凡尘
5楼2013-07-20 16:26:31
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