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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 转化长不出来菌
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hb467116237

金虫 (小有名气)

[求助] 转化长不出来菌

微生物的虫虫们看过来 ，帮我解决下这个问题：我构建的载体大小在16~17kb之间，转ET12567/pUZ8002，重复了好几次都长不出菌来。用的质粒量分别有2、5、10微，是钙转的感受态。不知道什么原因，这步做不出来，实验就没法进行了，捉急啊。
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1楼 2013-07-18 09:41:07
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风之游魂

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你用的是什么菌株？有些菌株因为本身细胞壁厚度问题就很难转化，比如枯草芽孢杆菌，得用特殊的方法
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4楼2013-07-19 08:45:45
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hb467116237: 金币+2 2013-07-18 12:33:11
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-07-18 16:48:42
大载体用电转化比较好，熱激对大片段的效率比较低。
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2楼2013-07-18 10:09:05
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hb467116237

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-18 10:09:05
大载体用电转化比较好，熱激对大片段的效率比较低。

我试试看，谢了
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3楼2013-07-18 12:32:38
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hb467116237

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 风之游魂 at 2013-07-19 08:45:45
不知道你用的是什么菌株？有些菌株因为本身细胞壁厚度问题就很难转化，比如枯草芽孢杆菌，得用特殊的方法

我是以pOJ446克隆出来一个载体，连有tsr的抗性基因，后边要做大片段缺失。
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5楼2013-07-19 10:22:39
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