| 查看: 1002 | 回复: 5 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
sls19881024银虫 (小有名气)
|
[求助]
原核表达相关操作
|
||
| 大家在做原核表达的时候有没有遇到连接不上的情况啊 双酶切的条带都很单一，T4 ligase连接过夜后，涂平板不长菌斑咋回事啊？ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有171人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 原核表达做不出来了！
已经有15人回复
- 原核表达和SDS-PAGE
已经有9人回复
- 稀有密码子占多大比例，会影响重组基因的表达？
已经有7人回复
- 原核表达蛋白分子量大小
已经有13人回复
- 做原核表达引物设计的有关问题
已经有14人回复
- 原核表达载体的构建
已经有37人回复
- 求原核表达诱导表达具体操作？？？
已经有14人回复
- 原核表达蛋白变小
已经有4人回复
- 真核表达载体 原核 区别与扩增
已经有8人回复
- 原核表达形成了包涵体怎么办啊？
已经有22人回复
- pET-28a原核不能表达目的蛋白
已经有17人回复
- 枯草芽孢杆菌聚谷氨酸降解酶基因的原核表达及酶性质分析
已经有5人回复
- 原核表达问题
已经有14人回复
- 原核表达蛋白诱导不出来
已经有16人回复
- 关于原核表达中，IPTG,KAN等的配制和最终工作浓度问题！！！
已经有16人回复
- 原核表达系统不表达目的蛋白
已经有8人回复
- 原核表达菌液裂解
已经有14人回复
- 原核表达标签的切除，及信号肽的影响
已经有5人回复
- 求助 原核表达WB 多条带
已经有11人回复
- 原核同时表达两个蛋白，需要自行给其中一个加标签，请教了！！！
已经有4人回复
- 【求助/交流】酵母表达和原核表达，在技术上有什么不同？
已经有6人回复
- 【求助/交流】原核表达羊基因，cDNA长度约为3kb，基因为一种有活性的酶
已经有15人回复
bleach060452
新虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 68 (初中生)
- 金币: 969.9
- 散金: 15
- 红花: 4
- 帖子: 201
- 在线: 88.2小时
- 虫号: 1004577
- 注册: 2010-04-24
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助！ 2013-07-05 15:07:51
sls19881024: 金币+5, ★有帮助 2013-07-06 07:45:48
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助！ 2013-07-05 15:07:51
sls19881024: 金币+5, ★有帮助 2013-07-06 07:45:48
|
连接就是这样的，首先你要优化体系、操作，然后有时真的是靠运气的。。。。 建议：1.像楼上说的，确定酶切没问题 2.优化片段与质粒的配比，可以多做几个配比的同时连接过夜 3.16度或22度（根据连接酶来确定）连接过夜后，转一批；剩下的继续4度连接几小时转一批；甚至4度连接1天以后都可以试一下的 4.最后确定抗生素、浓度是否正确 5.祈求好运。。。 |
5楼2013-07-05 10:49:20
武穆大成
木虫 (著名写手)
笨蛋
- 应助: 79 (初中生)
- 金币: 3526.5
- 散金: 344
- 红花: 3
- 帖子: 1575
- 在线: 230.6小时
- 虫号: 1743585
- 注册: 2012-04-08
- 专业: 免疫生物学
2楼2013-07-04 21:56:53
lwiaanngg
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 46 (小学生)
- 贵宾: 0.773
- 金币: 7403.2
- 散金: 24
- 红花: 12
- 帖子: 1211
- 在线: 110.3小时
- 虫号: 43541
- 注册: 2004-04-10
- 专业: 应用高分子化学与物理
3楼2013-07-05 08:19:16
sls19881024
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 253.3
- 散金: 35
- 红花: 1
- 帖子: 55
- 在线: 50.7小时
- 虫号: 1427783
- 注册: 2011-10-05
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
4楼2013-07-05 09:18:06
投票:
30