应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR结果分析
81/1返回列表
查看: 1128  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

舟之帆

木虫 (小有名气)

[求助] PCR结果分析

各位大侠求救啊：
   我最近一直在做PCR，前天提的CDNA（总RNA纯度为1.4多），昨天PCR，结果跑出了单一条带（即我的目的基因），可是今天又提了CDNA（总RNA纯度为1.5多），步骤方法都一样，今天顺便PCR，结果发现P出了好多杂带，这是为什么啊？
   PCR结果有好多杂带，如果按这个条件可以做实时荧光定量PCR不？
   小女子不胜感激-------
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-07-04 17:00:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
舟之帆: 金币+5 2013-07-04 21:51:31
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-04 22:20:39
好多杂带是不能做荧光定量的。。另外，，rna纯度是什么概念？浓度吗？浓度高不一定质量也高，RNA要看浓度，看260/280的值，要在2.0左右。还要跑胶看条带，有无降解。。祝好、、可以交流
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

舟之帆
2楼2013-07-04 21:45:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

舟之帆

木虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 武穆大成 at 2013-07-04 21:45:37
好多杂带是不能做荧光定量的。。另外，，rna纯度是什么概念？浓度吗？浓度高不一定质量也高，RNA要看浓度，看260/280的值，要在2.0左右。还要跑胶看条带，有无降解。。祝好、、可以交流

RNA浓度有0.4ug/ul，260/280大概1.6。
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-04 21:51:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 舟之帆 at 2013-07-04 21:51:17
RNA浓度有0.4ug/ul，260/280大概1.6。...

哥们，1.6。。。。你跑个胶看下吧。我觉得这RNA的质量不太好。。
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-04 21:53:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
舟之帆: 金币+1, ★有帮助, 细胞 2013-07-08 14:04:34
你是从什么材料里面提取的RNA，260/280 1.4或者1.5确实低了点，不知道你是否有跑DNA胶看下你的RNA的完整度
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
5楼2013-07-04 22:22:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

舟之帆

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 武穆大成 at 2013-07-04 21:45:37
好多杂带是不能做荧光定量的。。另外，，rna纯度是什么概念？浓度吗？浓度高不一定质量也高，RNA要看浓度，看260/280的值，要在2.0左右。还要跑胶看条带，有无降解。。祝好、、可以交流

我改了一下退火温度，结果是比较好的，可是还是有点拖尾，想问问是怎么回事，怎么办？辛苦了！
赞一下 回复此楼
6楼2013-07-08 14:15:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

舟之帆

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 武穆大成 at 2013-07-04 21:45:37
好多杂带是不能做荧光定量的。。另外，，rna纯度是什么概念？浓度吗？浓度高不一定质量也高，RNA要看浓度，看260/280的值，要在2.0左右。还要跑胶看条带，有无降解。。祝好、、可以交流

我改了一下退火温度，结果是好点了，可是还是有点拖尾，怎么回事，怎么办？辛苦了，麻烦了....
赞一下 回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 7月6日跟8日的实验结果.doc
    • 2013-07-08 14:20:16, 497 K
7楼2013-07-08 14:20:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+2, 感谢应助！ 2013-07-08 15:21:35
舟之帆: 金币+2 2013-07-19 21:34:13
舟之帆: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-09-04 19:13:25
引用回帖:
7楼: Originally posted by 舟之帆 at 2013-07-08 14:20:47
我改了一下退火温度，结果是好点了，可是还是有点拖尾，怎么回事，怎么办？辛苦了，麻烦了.......

这位童鞋。。我猜，你给我看的应该是反转录后pcr的结果，我个人觉着这个结果还是挺好的。但还是有点拖尾。。拖尾的原因有可能是因为模板浓度有点大，可以做个梯度稀释下再跑pcr看看。。还有就是有可能是非特异扩增，这个是不是得做个荧光定量看下。看下溶解曲线怎么样，。。祝好
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2013-07-08 15:06:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 舟之帆 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +8 majunge000 2026-08-10 9/450 2026-08-12 22:17 by 虫友是什么虫
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +10 Tide man 2026-08-11 10/500 2026-08-12 20:59 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] 不应该看fileCode +5 且听虎啸 2026-08-12 6/300 2026-08-12 16:26 by Tide man
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭