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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE电泳图这样算成功吗？
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lillian菲

银虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE电泳图这样算成功吗？

大家好，最近在做SDS-PAGE，大家帮帮看看这个图可以接着做WESTERN BLOT吗？我老板说这图表达量不行，不能接下来做WESTERN BLOT，我很是郁闷。（蛋白大小在marker97.2附近，1.3泳道是未诱导，2,4是诱导）请大家帮忙分析下是否有表达，谢谢！
SDS-PAGE电泳图这样算成功吗？
360截图20130701104500153.jpg
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1楼 2013-07-01 10:46:28
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bleach060452

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-04 01:41:28
WB是可以检的，因为很灵敏，可以看到条带就足够检测了。

但是你这又到之后几乎没变化呀，都是本地表达~~优化下表达条件吧，表达量确实差点，可以说表达这一步的实验结果较差，老板应该是觉得你这一步没做好呢，不让你做WB，毕竟抗体不便宜。

如果不是做重组表达，变化再明显点就说的过去了，可以WB之。如果是重组表达，那么这根本不行，少年，别浪费抗体钱~~
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3楼2013-07-01 14:03:17
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kx444555

至尊木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-04 01:41:17
WESTERN BLOT还是很灵敏的，够做WESTERN BLOT的，但是这个量够不够用还要看你接下来要做什么试验
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2楼2013-07-01 11:47:39
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lillian菲

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-07-01 14:03:17
WB是可以检的，因为很灵敏，可以看到条带就足够检测了。

但是你这又到之后几乎没变化呀，都是本地表达~~优化下表达条件吧，表达量确实差点，可以说表达这一步的实验结果较差，老板应该是觉得你这一步没做好呢，不 ...

谢谢指点，我的是重组表达，是不是表达量应该很大才对是吧？
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4楼2013-07-01 14:14:35
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sl35537417

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-07-04 01:41:38
貌似有点过表达的意思  但是应该是少下面的那条带 不是你指的那条！再着 理论上过表达应该很多 很明显 但是由于蛋白不一  在体内收到的调控就不一样  最终表达的量也就不一样  这种情况也经常碰到  可以wb检测一下试试
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5楼2013-07-01 14:20:08
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