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SDS-PAGE电泳图这样算成功吗?
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lillian菲
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[交流]
SDS-PAGE电泳图这样算成功吗?
大家好,最近在做SDS-PAGE,大家帮帮看看这个图可以接着做WESTERN BLOT吗?我老板说这图表达量不行,不能接下来做WESTERN BLOT,我很是郁闷。(蛋白大小在marker97.2附近,1.3泳道是未诱导,2,4是诱导)请大家帮忙分析下是否有表达,谢谢!
360截图20130701104500153.jpg
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2013-07-01 10:46:28
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3楼
:
Originally posted by
bleach060452
at 2013-07-01 14:03:17
WB是可以检的,因为很灵敏,可以看到条带就足够检测了。
但是你这又到之后几乎没变化呀,都是本地表达~~优化下表达条件吧,表达量确实差点,可以说表达这一步的实验结果较差,老板应该是觉得你这一步没做好呢,不 ...
谢谢指点,我的是重组表达,是不是表达量应该很大才对是吧?
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4楼
2013-07-01 14:14:35
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5楼
:
Originally posted by
sl35537417
at 2013-07-01 14:20:08
貌似有点过表达的意思 但是应该是少下面的那条带 不是你指的那条!再着 理论上过表达应该很多 很明显 但是由于蛋白不一 在体内收到的调控就不一样 最终表达的量也就不一样 这种情况也经常碰到 可以wb检测一下试 ...
老板就是因为表达的量不是很大,所以不让我做western blot,说这个做出来了WB就很容易做了,哎。嗯,我指的是不太确切,应该是再往下一点的那条带
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6楼
2013-07-01 14:28:46
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8楼
:
Originally posted by
lemontree7681
at 2013-07-02 19:46:22
如果表达量高高的,就不要做WB鉴定了吧
我也是这么觉得的,但老板就说要表达量很高,才让做wb,估计想一次成功吧,心疼抗体啊,呵呵
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9楼
2013-07-02 19:51:36
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