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lillian菲

银虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE电泳图这样算成功吗？

大家好，最近在做SDS-PAGE，大家帮帮看看这个图可以接着做WESTERN BLOT吗？我老板说这图表达量不行，不能接下来做WESTERN BLOT，我很是郁闷。（蛋白大小在marker97.2附近，1.3泳道是未诱导，2,4是诱导）请大家帮忙分析下是否有表达，谢谢！
SDS-PAGE电泳图这样算成功吗？
360截图20130701104500153.jpg
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1楼2013-07-01 10:46:28
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lillian菲

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-07-01 14:03:17
WB是可以检的，因为很灵敏，可以看到条带就足够检测了。

但是你这又到之后几乎没变化呀，都是本地表达~~优化下表达条件吧，表达量确实差点，可以说表达这一步的实验结果较差，老板应该是觉得你这一步没做好呢，不 ...

谢谢指点，我的是重组表达，是不是表达量应该很大才对是吧？
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4楼2013-07-01 14:14:35
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lillian菲

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sl35537417 at 2013-07-01 14:20:08
貌似有点过表达的意思  但是应该是少下面的那条带 不是你指的那条！再着 理论上过表达应该很多 很明显 但是由于蛋白不一  在体内收到的调控就不一样  最终表达的量也就不一样  这种情况也经常碰到  可以wb检测一下试 ...

老板就是因为表达的量不是很大，所以不让我做western blot，说这个做出来了WB就很容易做了，哎。嗯，我指的是不太确切，应该是再往下一点的那条带
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6楼2013-07-01 14:28:46
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lillian菲

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lemontree7681 at 2013-07-02 19:46:22
如果表达量高高的，就不要做WB鉴定了吧

我也是这么觉得的，但老板就说要表达量很高，才让做wb，估计想一次成功吧，心疼抗体啊，呵呵
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9楼2013-07-02 19:51:36
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