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lillian菲

银虫 (小有名气)

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[交流] SDS-PAGE电泳图这样算成功吗？

大家好，最近在做SDS-PAGE，大家帮帮看看这个图可以接着做WESTERN BLOT吗？我老板说这图表达量不行，不能接下来做WESTERN BLOT，我很是郁闷。（蛋白大小在marker97.2附近，1.3泳道是未诱导，2,4是诱导）请大家帮忙分析下是否有表达，谢谢！

360截图20130701104500153.jpg

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1楼 2013-07-01 10:46:28

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lillian菲

银虫 (小有名气)

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5楼: Originally posted by sl35537417 at 2013-07-01 14:20:08
貌似有点过表达的意思但是应该是少下面的那条带不是你指的那条！再着理论上过表达应该很多很明显但是由于蛋白不一在体内收到的调控就不一样最终表达的量也就不一样这种情况也经常碰到可以wb检测一下试 ...

老板就是因为表达的量不是很大，所以不让我做western blot，说这个做出来了WB就很容易做了，哎。嗯，我指的是不太确切，应该是再往下一点的那条带

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6楼2013-07-01 14:28:46

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kx444555

至尊木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-04 01:41:17

WESTERN BLOT还是很灵敏的，够做WESTERN BLOT的，但是这个量够不够用还要看你接下来要做什么试验

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2楼2013-07-01 11:47:39

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bleach060452

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-04 01:41:28

WB是可以检的，因为很灵敏，可以看到条带就足够检测了。

但是你这又到之后几乎没变化呀，都是本地表达~~优化下表达条件吧，表达量确实差点，可以说表达这一步的实验结果较差，老板应该是觉得你这一步没做好呢，不让你做WB，毕竟抗体不便宜。

如果不是做重组表达，变化再明显点就说的过去了，可以WB之。如果是重组表达，那么这根本不行，少年，别浪费抗体钱~~

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3楼2013-07-01 14:03:17

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lillian菲

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引用回帖:

3楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-07-01 14:03:17
WB是可以检的，因为很灵敏，可以看到条带就足够检测了。

但是你这又到之后几乎没变化呀，都是本地表达~~优化下表达条件吧，表达量确实差点，可以说表达这一步的实验结果较差，老板应该是觉得你这一步没做好呢，不 ...

谢谢指点，我的是重组表达，是不是表达量应该很大才对是吧？

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4楼2013-07-01 14:14:35

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