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引物GC含量只有13%,怎么扩增
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jhsu627
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引物GC含量只有13%,怎么扩增
引物GC含量低,用什么办法来解决?退火温度40摄氏度了,但出现了一条目的条带,请问各位:这种情况,需要增加Mg2离子含量吗?还是增加退火的时间?有什么好办法,大家有没有经验,求指教!谢谢!
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2013-06-27 05:25:16
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一般来说,有些试剂厂家都有一些GC buffer的,你可以买来试一下
试验顺利~~
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总有一天我要修改用户名。
2楼
2013-06-27 09:07:42
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引物5'端增加Gs或Cs
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趁着牙口好,千万不要节食
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2013-06-27 10:23:25
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jhsu627
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谢谢!
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不要加GGG或CCC这样的
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biology-boy
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137167741: 金币+1, 小木虫鼓励交流~~
2013-06-28 16:14:23
楼主把引物加长点,使得GC%到40%+,或者用nest PCR用全新的引物和起始位点,不然硬用楼主现在的引物PCR效果不好,以后可能麻烦更大。
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7楼
2013-06-28 16:01:08
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