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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 引物GC含量只有13%，怎么扩增
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jhsu627

木虫 (小有名气)

[求助] 引物GC含量只有13%，怎么扩增

引物GC含量低，用什么办法来解决？退火温度40摄氏度了，但出现了一条目的条带，请问各位：这种情况，需要增加Mg2离子含量吗？还是增加退火的时间？有什么好办法，大家有没有经验，求指教！谢谢！
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1楼2013-06-27 05:25:16
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般来说，有些试剂厂家都有一些GC  buffer的，你可以买来试一下
试验顺利~~
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总有一天我要修改用户名。
2楼2013-06-27 09:07:42
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t929820893

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引物5'端增加Gs或Cs
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趁着牙口好，千万不要节食
3楼2013-06-27 10:23:25
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jhsu627

木虫 (小有名气)
谢谢！
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4楼2013-06-27 11:39:00
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wangchigon

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不要加GGG或CCC这样的
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5楼2013-06-27 16:26:39
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biology-boy

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
6楼2013-06-27 18:56:47
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫鼓励交流~~ 2013-06-28 16:14:23
楼主把引物加长点，使得GC%到40%+，或者用nest PCR用全新的引物和起始位点，不然硬用楼主现在的引物PCR效果不好，以后可能麻烦更大。
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7楼2013-06-28 16:01:08
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