应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我做了3周的载体构建了就是构建不上，求助啊
31/1返回列表
查看: 2665  |  回复: 22
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

我晴天一片

新虫 (初入文坛)

[求助] 我做了3周的载体构建了就是构建不上，求助啊

我做了3周的载体构建了就是构建不上，转化后会有菌落也能摇起来，提完质粒用双酶切鉴定跑胶后什么条带都没有了，现在郁闷至极，不知道哪里出问题了，各位大侠求助啊！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-23 11:25:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bingdong05

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主详细说下你的构建转化过程，不然不好分析原因啊，若是pcr产物且是双切连接到目的载体的话，检查下：1）载体双切的两个酶距离是否过近，导致双切变成单切；2）目的序列是否酶切位点设计引物时是否添加保护碱基，若没加保护碱基，则先做TA连接，转化，挑取转化子，验证，测序，正确后再从TA载体上双切目的片段，再连接至目的载体
赞一下 回复此楼
22楼2013-06-28 15:36:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bingdong05

银虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 我晴天一片 at 2013-06-23 21:33:36
有条带，但是是好几条，一般做到这里我就觉得不对了，可是我提出来的到底是什么呢？？就是不知道什么原因...

质粒跑电泳几条带，一般质粒跑电泳的话出现2条或3条带
赞一下 回复此楼
23楼2013-06-28 15:38:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 我晴天一片 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭