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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】载体构建方面的问题
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zwx26_2006

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】载体构建方面的问题 已有6人参与

请问我能不能将目的基因直接插入到pBI121载体的35S启动子和GUs基因之间啊？
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1楼 2010-05-10 16:21:52
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jasco

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
从操作而言，是可以的，从目的而言，看你做什么了
另外，这个载体比较大，比较难连接
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2楼2010-05-10 16:56:06
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
完全可以啊，就是不知道融合之后你的蛋白还有活性吗
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-05-10 17:04:17
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434744419

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是要做基因的过表达吗  如果是而且还想进行GUS 分析的话 ，就得把目的基因的终止子去除否则的话，GUS 就不会表达了
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4楼2010-05-10 17:49:10
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同意楼上，如果要GUS与目的基因一块表达，最好把目的基因的终止序列去除，如果你只想组成型表达，那可以再加上35s启动子啊,那样的话就不影响GUS表达活性
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5楼2010-05-10 18:03:45
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ququr008

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼上说的都对，实践上需要楼主在注意以上原则的基础上做出来再看！
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6楼2010-05-10 18:29:39
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zwx26_2006

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 434744419 at 2010-05-10 17:49:10:
是要做基因的过表达吗  如果是而且还想进行GUS 分析的话 ，就得把目的基因的终止子去除否则的话，GUS 就不会表达了

将目的基因的终止密码子去除吗？如果那样，翻译出的蛋白是不是就与GUS融合了？会不会影响目的基因的功能啊？
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7楼2010-05-11 21:23:01
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zwx26_2006

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jasco at 2010-05-10 16:56:06:
从操作而言，是可以的，从目的而言，看你做什么了
另外，这个载体比较大，比较难连接

我要做基因的过表达，听同学说不将GUS切掉可能会影响目的基因的表达，果真会影响吗？
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8楼2010-05-11 21:27:40
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