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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 跨膜蛋白原核表达、纯化
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yafen0628

金虫 (正式写手)

[求助] 跨膜蛋白原核表达、纯化

本人用PET-28载体表达了真核跨膜蛋白，表达量偏低，形成包涵体，用8M尿素溶解两天后目的蛋白还是在包涵体中，这是怎么回事呀，有没有好的办法帮助溶解？？？？另外为什么有跨膜区的蛋白原核表达效果不好呢？？？、急急急。。。
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1楼 2013-06-21 23:10:21
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heroxuning

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

尝试更高浓度的尿素，或者6M 盐酸胍变性看看
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5楼2013-07-18 09:10:59
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lijian670417

铁虫 (初入文坛)
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 最后的QQ亮了啊，以后留联系方式短消息 2013-07-16 18:53:08
myprayer: 金币-1, 屏蔽内容, 违规存档 2013-07-16 19:01:08
本帖内容被屏蔽
2楼2013-07-16 18:07:03
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

E.coli表达真核蛋白时，易形成包涵体的问题是个常见的问题，留下邮箱我发份资料给你
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3楼2013-07-17 09:05:56
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aoda123

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

跨膜蛋白一般疏水性很强，原核表达量不高。建议你在载体上加一段可溶性标签，增加其可溶性。
   顺便问一下，你用的哪种表达菌，多少度诱导呢？
赞一下(1人) 回复此楼
身体健康，工作顺利
4楼2013-07-17 09:09:31
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