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yafen0628

金虫 (正式写手)

[求助] 跨膜蛋白原核表达、纯化

本人用PET-28载体表达了真核跨膜蛋白,表达量偏低,形成包涵体,用8M尿素溶解两天后目的蛋白还是在包涵体中,这是怎么回事呀,有没有好的办法帮助溶解????另外为什么有跨膜区的蛋白原核表达效果不好呢???、急急急。。。
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heroxuning

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

尝试更高浓度的尿素,或者6M 盐酸胍变性看看
5楼2013-07-18 09:10:59
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lijian670417

铁虫 (初入文坛)

myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你的更多精彩 最后的QQ亮了啊,以后留联系方式短消息 2013-07-16 18:53:08
myprayer: 金币-1, 屏蔽内容, 违规存档 2013-07-16 19:01:08
本帖内容被屏蔽

2楼2013-07-16 18:07:03
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

E.coli表达真核蛋白时,易形成包涵体的问题是个常见的问题,留下邮箱我发份资料给你
3楼2013-07-17 09:05:56
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aoda123

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

跨膜蛋白一般疏水性很强,原核表达量不高。建议你在载体上加一段可溶性标签,增加其可溶性。
   顺便问一下,你用的哪种表达菌,多少度诱导呢?
身体健康,工作顺利
4楼2013-07-17 09:09:31
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