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老地方

金虫 (正式写手)

[交流] 怎样表达全长细菌的跨膜蛋白? 已有3人参与

最近想做一个细菌跨膜蛋白的体外功能,之前纯化出了可溶性的截断的目的蛋白,结果在体外没有合成酶活性。因此就想表达全长试试,使用的载体是pET28b,结果根本就没有诱导表达条带。请问大家都是怎么表达和纯化跨膜蛋白的啊?
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攀科学高峰
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是不是直接形成包涵体了?还是说压根不表达?
2楼2012-11-01 07:21:19
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yandz680717

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
做westerning blotting看是否表达了
3楼2012-11-01 08:26:16
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老地方

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-01 07:21:19
是不是直接形成包涵体了?还是说压根不表达?

压根就不表达,换载体试试
攀科学高峰
4楼2012-11-01 09:28:09
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xl0071334

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
换宿主菌,例如C41,C43是专门表达毒蛋白和膜蛋白的,或者酵母液可以
5楼2012-11-03 12:06:10
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