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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 跨膜蛋白原核表达、纯化
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yafen0628

金虫 (正式写手)

[求助] 跨膜蛋白原核表达、纯化

本人用PET-28载体表达了真核跨膜蛋白，表达量偏低，形成包涵体，用8M尿素溶解两天后目的蛋白还是在包涵体中，这是怎么回事呀，有没有好的办法帮助溶解？？？？另外为什么有跨膜区的蛋白原核表达效果不好呢？？？、急急急。。。
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1楼 2013-06-21 23:10:21
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

E.coli表达真核蛋白时，易形成包涵体的问题是个常见的问题，留下邮箱我发份资料给你
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3楼2013-07-17 09:05:56
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aoda123

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

跨膜蛋白一般疏水性很强，原核表达量不高。建议你在载体上加一段可溶性标签，增加其可溶性。
   顺便问一下，你用的哪种表达菌，多少度诱导呢？
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身体健康，工作顺利
4楼2013-07-17 09:09:31
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普通回帖

lijian670417

铁虫 (初入文坛)
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 最后的QQ亮了啊，以后留联系方式短消息 2013-07-16 18:53:08
myprayer: 金币-1, 屏蔽内容, 违规存档 2013-07-16 19:01:08
本帖内容被屏蔽
2楼2013-07-16 18:07:03
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heroxuning

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

尝试更高浓度的尿素，或者6M 盐酸胍变性看看
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5楼2013-07-18 09:10:59
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九戒不是戒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by pypsak at 2013-07-17 09:05:56
E.coli表达真核蛋白时，易形成包涵体的问题是个常见的问题，留下邮箱我发份资料给你

能不能也给我发一份资料，我最近做一种G蛋白偶联受体的表达，1个月了还木有结果，压力很大，18717368665@163.com
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6楼2013-08-22 03:45:12
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yafen0628

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by pypsak at 2013-07-17 09:05:56
E.coli表达真核蛋白时，易形成包涵体的问题是个常见的问题，留下邮箱我发份资料给你

454289236@qq.com  谢谢啊
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7楼2013-08-29 19:44:14
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)

晕晕小版主~ 姑娘你好！

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

跨膜蛋白是出了名的难表达。。。原因是亲脂性。
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最好的年龄是，那一天，终于知道并且坚信自己有多好，不是虚张，不是夸浮，不是众人捧，是内心明明澈澈知道：是的，我就是这么好。
8楼2013-09-03 06:01:25
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dearu724

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
9楼2015-03-02 10:10:31
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dearu724

禁虫 (初入文坛)
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10楼2015-03-02 10:11:38
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