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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大量培养 诱导 蛋白没有差异表达
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zhaofangyu

新虫 (初入文坛)

[求助] 大量培养 诱导 蛋白没有差异表达 已有1人参与

我最近在做一个蛋白的原核表达，在做小量培养，诱导后，跑SDS PAGA胶可以看到有差异表达（IPTG诱导后蛋白油很明显的表达），然而在扩大培养 (2L的培养瓶中 500ml)培养，培养条件和小量表达完全一样。可以完全不表达。菌体速度生长很快。急求解答！！！
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1楼 2013-06-19 10:42:04
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zhaofangyu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 一壶月光 at 2013-06-19 14:54:40
你的表达宿主是大肠吧，小量培养诱导表达过程的条件是怎样的啊？

挑单克隆在平板上扩增之后，用15ml培养基（2yt培养基）37° ，200转培养，OD值达到0.6-0.8之间时。加入IPTG。30°，200转诱导3小时。
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6楼2013-06-19 15:07:11
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确定大量培养诱导时菌的OD与小量培养时的完全一样吗？
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2楼2013-06-19 11:33:00
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shzhao113

禁虫 (著名写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-20 09:12:13
本帖内容被屏蔽
3楼2013-06-19 13:22:59
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一壶月光

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-20 09:12:22
你的表达宿主是大肠吧，小量培养诱导表达过程的条件是怎样的啊？
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4楼2013-06-19 14:54:40
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