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zhaofangyu

新虫 (初入文坛)

[求助] 大量培养 诱导 蛋白没有差异表达 已有1人参与

我最近在做一个蛋白的原核表达,在做小量培养,诱导后,跑SDS PAGA胶可以看到有差异表达(IPTG诱导后蛋白油很明显的表达),然而在扩大培养 (2L的培养瓶中 500ml)培养,培养条件和小量表达完全一样。可以完全不表达。菌体速度生长很快。急求解答!!!
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shzhao113

禁虫 (著名写手)

★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-20 09:12:13
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3楼2013-06-19 13:22:59
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
确定大量培养诱导时菌的OD与小量培养时的完全一样吗?
2楼2013-06-19 11:33:00
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一壶月光

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-20 09:12:22
你的表达宿主是大肠吧,小量培养诱导表达过程的条件是怎样的啊?
4楼2013-06-19 14:54:40
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zhaofangyu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-19 11:33:00
确定大量培养诱导时菌的OD与小量培养时的完全一样吗?

是的 OD值达到0.6至0.8之间,再做的诱导。
5楼2013-06-19 15:01:40
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