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汕头大学海洋科学接受调剂
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huangq816

金虫 (正式写手)


[交流] 如何消除梯度洗脱中的梯度峰?

在做方法开发的时候,会发现只要是采用梯度洗脱的,总会有梯度洗脱峰。请问,怎么可以消除洗脱峰呢?有什么需要注意的事项,请大家踊跃发言。
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dalansong

木虫 (小有名气)


★ ★ ★
huangq816(金币+1): 谢谢参与
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-06-20 10:21:52
huangq816: 金币+1, 谢谢你的经验分享 2013-06-25 15:50:38
消除应该不行,但减弱是可以的
1. 流动相要找吸光度低的好试剂
2. 预先混合一定的溶剂:如甲醇-1%磷酸(10:90)10min变为(60:40)配置流动相为A:(甲醇-1%磷酸(10:90)预混合)-B:(甲醇-1%磷酸(60:40)预混合)初始为100:0  10min后变为0:100,基线波动会减少
16楼2013-06-20 09:57:32
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查看全部 18 个回答

huangq816(金币+1): 谢谢参与
尽量使用高纯度试剂,保证配制器具洁净,甚至实验室环境
2楼2013-06-17 09:52:38
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quiliyun

金虫 (初入文坛)



huangq816(金币+1): 谢谢参与
有的时候改变波长会有很好效果,综合各方面,在高波长段选择一个合适的波长,梯度峰会减弱不少,不过会降低你的方法检出限,但是这应该不是大问题。
12楼2013-06-17 16:45:15
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lee10yie

捐助贵宾 (著名写手)



huangq816(金币+1): 谢谢参与
一般而言,使梯度变化更慢一些,选择波长更长一些的检测波长,可以使梯度产生的峰变小。楼主可以试试。当然同时要考虑到灵敏度和分离度。
13楼2013-06-19 18:40:51
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简单回复
gzl99013楼
2013-06-17 10:27   回复  
huangq816(金币+1): 谢谢参与
祝福祝福祝福祝福祝福祝福!
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