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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 阳性克隆检测不到
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yangjianchen

铜虫 (小有名气)

[求助] 阳性克隆检测不到

请问每次我划线后可以检测到阳性，并且阳性条带很亮，但是划了单斑后做穿刺的时候就检测不到阳性了，请问这是什么原因？而且很多时候检测划线的时候也不稳定，第一次检测有，第二次可能就没有了！
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1楼 2013-06-07 19:22:01
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yangjianchen

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cynthia8225 at 2013-06-07 22:05:38
可以尝试提个质粒重新做个转化吧。。。还有不太懂你的意思。。。你是直接的菌的表型有变化还是质粒克隆呢？？要是菌的表型发生变化了是不是有污染了呢？

就是普通的TA连接，然后转化，涂板后挑选单菌落划线检测，有阳性，用这条线做穿刺，就没有阳性了
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3楼2013-06-07 23:05:28
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cynthia8225

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yangjianchen(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-08 00:07:11
可以尝试提个质粒重新做个转化吧。。。还有不太懂你的意思。。。你是直接的菌的表型有变化还是质粒克隆呢？？要是菌的表型发生变化了是不是有污染了呢？
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2楼2013-06-07 22:05:38
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