24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2026  |  回复: 3

Bella0224

金虫 (小有名气)

[求助] 农杆菌感受态细胞 是否有质粒

各种虫友好!

我现在用的农杆菌感受态细胞是自己制作的,利用发根农杆菌A4和CaCl2,保存在-80,因为A4有卡那抗性,而我现在做的重组质粒也是卡那抗性的,所以现在即使转化进去也无法进行筛选。。。。

请问各位,自己做的农杆菌感受态细胞还有质粒么?是不是就没抗性的了呢?

如果有,我应该怎么办呢?是要更换一个菌种,还是?我看现在的发根农杆菌除了ATCC系列的,好像都是经人工改造的Kan抗性,可是ATCC菌种购买不到,而且到货要3个月。。。

快毕业的孩纸伤不起啊。。。。。。。

求助各位。。。。。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主做之前应该好好考虑啊,重组质粒需要有不同抗性。你做感受态,不影响原本菌株的抗性。试试向其他实验室求助吧,找个其他抗性的菌株或者重做质粒
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2013-05-30 16:22:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

顾在

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-05-30 16:22:48
楼主做之前应该好好考虑啊,重组质粒需要有不同抗性。你做感受态,不影响原本菌株的抗性。试试向其他实验室求助吧,找个其他抗性的菌株或者重做质粒

自己做的农杆菌感受态细胞有质粒。
相同抗性也没关系吧,你可以做完转化后用载体上一个引物与基因上的引物检测下,若对了,你就抽提质粒(虽然质粒抽提效果不如大肠杆菌的),转到大肠杆菌中后抽提质粒酶切验证下,虽然麻烦,但可行。
3楼2013-06-10 22:51:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 顾在 at 2013-06-10 22:51:24
自己做的农杆菌感受态细胞有质粒。
相同抗性也没关系吧,你可以做完转化后用载体上一个引物与基因上的引物检测下,若对了,你就抽提质粒(虽然质粒抽提效果不如大肠杆菌的),转到大肠杆菌中后抽提质粒酶切验证下 ...

你说得对,可以这么做,只是太麻烦了,最好在一开始设计时考虑好。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
4楼2013-06-10 22:55:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Bella0224 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +4 yexuqing 2026-04-19 4/200 2026-04-20 14:47 by brantleo
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 通信工程求调剂!!! +7 zlb770521 2026-04-14 7/350 2026-04-19 20:56 by Equinoxhua
[考研] 297,工科调剂? +11 河南农业大学-能 2026-04-14 11/550 2026-04-19 20:07 by Equinoxhua
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-19 17:16 by 中豫男
[考研] 求调剂 +10 小聂爱学习 2026-04-16 12/600 2026-04-19 16:51 by 中豫男
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +10 lzmk 2026-04-14 11/550 2026-04-19 16:42 by 中豫男
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 6/300 2026-04-19 13:00 by Aaron_zyn
[考研] 307中医考研调剂 +9 于以采蘩 2026-04-14 9/450 2026-04-19 08:41 by 烟雨流涯
[考研] 0854求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-15 27/1350 2026-04-19 01:59 by 烟雨流涯
[考研] 300求调剂 +12 橙a777 2026-04-15 12/600 2026-04-18 23:51 by 路病情
[考研] 22408 312求调剂 +24 门路摸摸 2026-04-14 26/1300 2026-04-18 13:04 by wunaiy88
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 急需调剂 +9 绝不放弃22 2026-04-15 10/500 2026-04-18 08:09 by chixmc
[考研] 一志愿华中农业071010,320求调剂 +17 困困困困坤坤 2026-04-14 19/950 2026-04-17 20:08 by 关一盏灯cd
[考研] 一志愿中科大材料与化工,353分还有调剂学校吗 +10 否极泰来2026 2026-04-15 12/600 2026-04-17 17:54 by mapenggao
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
[考研] 药学求调剂 +14 喽哈加油 2026-04-14 16/800 2026-04-16 10:15 by beilsong20
[考研] 求调剂学校 +14 不会吃肉 2026-04-13 16/800 2026-04-15 21:59 by noqvsozv
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
信息提示
请填处理意见