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shishun2008

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot 常见问题求助

我今天做的western blot 目的蛋白条带 荧光不是很强,目的蛋白比例1:1000,内参蛋白β-Actin荧光很强,内参一抗比例1:5000,这是什么原因啊?
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唐朝豪放男

铜虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-26 13:27:32
可能是目的蛋白量确实很少,也可能是目的蛋白一抗太稀了,每种抗体的稀释倍数是不一样的,看说明书噻
3楼2013-05-25 22:40:56
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
shishun2008(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-26 13:27:18
内参荧光很强,目的条带荧光不强,这很正常啊,不是每一个抗体都像内参那么好用
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-05-25 22:31:53
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1759005335

铁虫 (初入文坛)

是的,目的蛋白荧光和抗体亲和性,浓度,样本目的蛋白的量都有关系的,
just do it
4楼2013-06-04 21:28:16
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