24小时热门版块排行榜    

查看: 3904  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lslsdjn

金虫 (正式写手)

[求助] 为什么还原变性电泳得到的分子量应该大于非还原非变性??急求!

同一种蛋白,
还原变性电泳条件:2*SDS上样缓冲液,加巯基乙醇,煮沸5min,考马斯染色,得分子量约为67kDa;
非还原非变性电泳条件:2*SDS上样缓冲液不加巯基乙醇,不煮沸,活性染色,的分子量约为45kDa。
按原理来说还原变性电泳得到的分子量应该小于非还原非变性,但是看到一篇文献却是相反,请教各位!多谢多谢!

[ Last edited by lslsdjn on 2013-5-25 at 15:43 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

如果有来生,我想做棵草!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Amber5662

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lslsdjn at 2013-05-26 11:00:43
我想问的是问什么变性还原电泳条件得到的分子量小于非变性非还原?...

请问,您遇到的这个问题有得到解决吗?我今天的非还原SDS-PAGE的条带分子量也小于还原SDS-PAGE的?也一直想不明白。
9楼2016-07-25 20:01:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 专家考核, 辛苦了 2013-05-25 21:45:51
lslsdjn: 金币+5, ★有帮助, 这个不是我做的实验,是我从一篇文献中看到的实验现象,谢谢! 2013-05-26 10:59:49
你的实验中存在一个问题,就是非还原非变性电泳按照你给的条件实际上已经变性了,因为你加了2*SDS上样缓冲液,里面是有SDS的。
2楼2013-05-25 20:06:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lslsdjn: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢! 2013-05-26 11:02:33
煮沸可能引起一些膜蛋白形成aggregate,所以分子量可能会变大。即使不加巯基乙醇、不煮沸,只要加了2*SDS缓冲液,样品也是变性了的,所以是否有活性值得怀疑。
3楼2013-05-26 02:00:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lslsdjn: 金币+5, ★有帮助, 谢谢! 2013-05-26 11:03:31
这个可以说明你的蛋白中含有二硫键,因此当你不加ME时候,电泳迁移率快,是因为结构更为紧凑。一般非变性胶所有试剂中都不含有SDS。
希望对你有用。
4楼2013-05-26 06:18:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 16:34 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 15/750 2026-11-06 13:49 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
信息提示
请填处理意见