| 查看: 1515 | 回复: 5 | ||
[求助]
求助关于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳若干问题的~~
|
|
本人分离纯化了一种蛋白质，为酸性蛋白质，想要用非变性PAGE看一下它的纯度，但是在网上搜索了一下关于非变性PAGE电泳的内容，五花八门，有若干问题，想向各位请教： 1.怎么选择分离胶与浓缩胶浓度，有何影响？ 2.本人在有的书中看到灌胶时需要先将分离胶灌好凝固，水封后放于4度放置12h，随用时再将浓缩胶灌入使用，但有些也没有要求这一步，是不是这步可以省略？ 3.电泳蛋白质的加样量大概是什么范围？多少浓度？ |
回复此楼» 猜你喜欢
售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急
已经有4人回复
-
5个%2F，非固定段22个字母
已经有13人回复
-
售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急
已经有4人回复
-
售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急
已经有4人回复
-
售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急
已经有5人回复
-
售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急
已经有6人回复
-
售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急
已经有7人回复
-
售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急
已经有4人回复
-
售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急
已经有5人回复
-
售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 部分蛋白不能进入非变性聚丙烯酰胺胶体内
已经有26人回复
- SSR PCR 聚丙烯酰胺凝胶电泳条带问题
已经有4人回复
- SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳成像结果的若干问题
已经有6人回复
- 蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳没有条带
已经有7人回复
- 为什么还原变性电泳得到的分子量应该大于非还原非变性？？急求！
已经有8人回复
- 新手请教变性蛋白的电泳，能电泳吗？
已经有4人回复
- 求助关于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳电泳液
已经有3人回复
- 为什么我的DNA 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 跑成这个鬼样？
已经有12人回复
- 【求助】蛋白质非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
已经有16人回复
- 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳电压方面的问题
已经有20人回复
- 4%PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）250bp处条带出现扭曲，求助！
已经有19人回复
- 聚丙烯酰胺二维凝胶电泳
已经有5人回复
- 银染色聚丙烯酰胺凝胶电泳
已经有13人回复
- 非变性聚丙烯酰胺凝胶不聚合
已经有7人回复
- 【求助】变性聚丙烯酰胺电泳的marker怎么处理
已经有9人回复
- 【求助/交流】请教聚丙烯酰胺凝胶问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】非变性聚丙烯酰胺电泳
已经有13人回复
- 【求助/交流】紧急求助关于单细胞凝胶电泳实验
已经有11人回复
2楼2013-04-16 21:00:55
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 感谢搭理，：） 2013-04-18 08:16:48
稚涵晓晓: 金币+8, ★★★很有帮助 2013-04-18 10:51:41
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 感谢搭理，：） 2013-04-18 08:16:48
稚涵晓晓: 金币+8, ★★★很有帮助 2013-04-18 10:51:41
|
有人理 首先浓度有影响,也是大蛋白浓度低点,小蛋白高点,但是考虑到等电点的因素,也不完全和蛋白大小相关.一般也没有marker可用,因为核质比都不一样.有种叫blue什么的胶说士可以有marker,电荷因素不那么大,但是也不如SDS PAGE那么好 灌胶后不必等那么长时间,凝了就行.长时间凝胶的好处是让胶凝得更彻底,就算SDS PAGE也是时间长点好,但是其实没必要 蛋白量不好说,一般是在可检测范围内约少越好,怕的是蛋白stuck在孔里.可使由于可能有不同的构象,一个蛋白可能会出来multi band,所以量确实需要自己找合适的量 |
3楼2013-04-17 08:48:04
4楼2013-04-18 10:50:07
5楼2013-04-18 11:06:18
6楼2013-04-18 12:30:19
10