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小妞116

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于DNase1 去除提取的RNA中基因组DNA的问题已有2人参与

从细胞中提取的RNA,逆转录后PCR,没有转染质粒的细胞也总是可以扩增出我的目的条带,这是什么原因?
还有就是通过DNase1 可以去除基因组DNA吗?去除后可以直接逆转录吗,还是得纯化后逆转录,那TAKARA的说明书实在是太复杂了。貌似第三步去除了基因组DNA后,第四步又开始了纯化,实在是没明白,求助大侠帮忙啊!!!
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wangqi1107

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


小妞116(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-20 16:13:57
去除DNA的过程当然很复杂,也很损失RNA,但是,你去除不干净,影响后续试验。第一,确认你的试剂没有污染,就是做个阴性对照。第二,确认你的gDNA纯化完全了。
8楼2013-05-20 09:55:01
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