应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家帮我看一张电泳图片~~~
101/1返回列表
查看: 993  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sls19881024

银虫 (小有名气)

[求助] 大家帮我看一张电泳图片~~~

大家帮我看一下这张图，第一泳道时maker2000,2、是正常扩增的，3和4是加入单引物的，5是加入双引物，没有模板的，这到底是哪个东西污染了？

D65C%AJH{4{VU1}3V%(9`FK.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
小松
1楼 2013-04-21 20:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-22 08:50:40
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-22 08:50:50
你要的是最上面的带吗？无模板P出带，说明PCR体系有模板污染。单引物P出带，说明体系里存在引物污染。
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-22 01:10:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sls19881024

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-22 01:10:44
你要的是最上面的带吗？无模板P出带，说明PCR体系有模板污染。单引物P出带，说明体系里存在引物污染。

可是我把所有的东西都换了新的后，只是有一个引物没有换（没法换），又出现这样的情况了  （ 泳道同上）

7~8IX{GKSG9DAM233BEPU%6.jpg
赞一下 回复此楼
小松
3楼2013-04-22 08:29:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangqi1107

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第二个泳道和第五个泳道加的东西一样吧？为什么条带大小不一样？三泳道单引物有条带，四泳道没有说明第三个泳道里的引物可能污染了模板！全部换完都怎么换的？具体点！说不定你换的东西仍然还有污染，所以要把具体信息发过来。
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-22 10:42:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sls19881024

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangqi1107 at 2013-04-22 10:42:07
第二个泳道和第五个泳道加的东西一样吧？为什么条带大小不一样？三泳道单引物有条带，四泳道没有说明第三个泳道里的引物可能污染了模板！全部换完都怎么换的？具体点！说不定你换的东西仍然还有污染，所以要把具体信 ...

第二和第五泳道，加的东西一样，只是第五没有加模板，换东西是，PCR重新拆新包装的用，引物重新稀释~~~
赞一下 回复此楼
小松
5楼2013-04-22 15:01:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by sls19881024 at 2013-04-22 08:29:06
可是我把所有的东西都换了新的后，只是有一个引物没有换（没法换），又出现这样的情况了  （ 泳道同上）

7~8IX{GKSG9DAM233BEPU%6.jpg
...

无模板对照P出条带，但与目标条带大小不同。可能是体系里污染了痕量其它来源的DNA，造成扩增。当加入正确的模板，P出理论片段。你做这个PCR的目的是什么？如果是克隆，只要能P出正确片段就可以了。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-04-23 00:01:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sls19881024

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-23 00:01:07
无模板对照P出条带，但与目标条带大小不同。可能是体系里污染了痕量其它来源的DNA，造成扩增。当加入正确的模板，P出理论片段。你做这个PCR的目的是什么？如果是克隆，只要能P出正确片段就可以了。...

是克隆基因用~~~
赞一下 回复此楼
小松
7楼2013-04-23 10:16:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by sls19881024 at 2013-04-23 10:16:08
是克隆基因用~~~...

克隆基因的话，可以回收胶上的目的条带后连入载体，测序正确就没问题了。
赞一下 回复此楼
8楼2013-04-23 14:28:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangqi1107

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

既然是克隆基因，有目的带就回收，污染了模板也没关系的。引物重新稀释还污染，可能你用的水污染了模板。PCR重新拆封的都包括什么东西，如果有你以前用的东西，也可能污染。水也可能污染了。
赞一下 回复此楼
9楼2013-04-23 14:35:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
环境，水，稀释用的水或其他缓冲液也可能会污染的
既然只是用于克隆，只要有目的条带出现，割胶回收就可以了。
赞一下 回复此楼
你的日子如何，你的力量也必如何！
10楼2013-04-24 11:27:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sls19881024 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 3/150 2026-02-08 03:05 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 3/150 2026-02-08 02:52 by vs90ilomwc
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 02:45 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 3/150 2026-02-08 02:32 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:27 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:25 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:12 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 02:07 by vs90ilomwc
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 01:46 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:45 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:32 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:12 by vs90ilomwc
[教师之家] 有院领导为了换新车，用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗 +4 hitsdu 2026-02-06 4/200 2026-02-07 13:07 by jurkat.1640
[考博] 天津大学招2026.09的博士生，欢迎大家推荐交流（博导是本人） +4 a793625982 2026-02-05 5/250 2026-02-07 10:57 by a793625982
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生｜MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[基金申请] 面上项目申报 +3 Tide man 2026-02-01 3/150 2026-02-05 22:56 by god_tian
[硕博家园] 博士延得我，科研能力直往上蹿 +7 偏振片 2026-02-02 7/350 2026-02-04 17:36 by 陈氏帝国
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭