应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家帮我看一张电泳图片~~~
101/1返回列表
查看: 1156  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sls19881024

银虫 (小有名气)

[求助] 大家帮我看一张电泳图片~~~

大家帮我看一下这张图，第一泳道时maker2000,2、是正常扩增的，3和4是加入单引物的，5是加入双引物，没有模板的，这到底是哪个东西污染了？

D65C%AJH{4{VU1}3V%(9`FK.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
小松
1楼 2013-04-21 20:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-22 08:50:40
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-22 08:50:50
你要的是最上面的带吗？无模板P出带，说明PCR体系有模板污染。单引物P出带，说明体系里存在引物污染。
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-22 01:10:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sls19881024

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-22 01:10:44
你要的是最上面的带吗？无模板P出带，说明PCR体系有模板污染。单引物P出带，说明体系里存在引物污染。

可是我把所有的东西都换了新的后，只是有一个引物没有换（没法换），又出现这样的情况了  （ 泳道同上）

7~8IX{GKSG9DAM233BEPU%6.jpg
赞一下 回复此楼
小松
3楼2013-04-22 08:29:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangqi1107

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第二个泳道和第五个泳道加的东西一样吧？为什么条带大小不一样？三泳道单引物有条带，四泳道没有说明第三个泳道里的引物可能污染了模板！全部换完都怎么换的？具体点！说不定你换的东西仍然还有污染，所以要把具体信息发过来。
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-22 10:42:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sls19881024

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangqi1107 at 2013-04-22 10:42:07
第二个泳道和第五个泳道加的东西一样吧？为什么条带大小不一样？三泳道单引物有条带，四泳道没有说明第三个泳道里的引物可能污染了模板！全部换完都怎么换的？具体点！说不定你换的东西仍然还有污染，所以要把具体信 ...

第二和第五泳道，加的东西一样，只是第五没有加模板，换东西是，PCR重新拆新包装的用，引物重新稀释~~~
赞一下 回复此楼
小松
5楼2013-04-22 15:01:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by sls19881024 at 2013-04-22 08:29:06
可是我把所有的东西都换了新的后，只是有一个引物没有换（没法换），又出现这样的情况了  （ 泳道同上）

7~8IX{GKSG9DAM233BEPU%6.jpg
...

无模板对照P出条带，但与目标条带大小不同。可能是体系里污染了痕量其它来源的DNA，造成扩增。当加入正确的模板，P出理论片段。你做这个PCR的目的是什么？如果是克隆，只要能P出正确片段就可以了。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-04-23 00:01:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sls19881024

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-23 00:01:07
无模板对照P出条带，但与目标条带大小不同。可能是体系里污染了痕量其它来源的DNA，造成扩增。当加入正确的模板，P出理论片段。你做这个PCR的目的是什么？如果是克隆，只要能P出正确片段就可以了。...

是克隆基因用~~~
赞一下 回复此楼
小松
7楼2013-04-23 10:16:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by sls19881024 at 2013-04-23 10:16:08
是克隆基因用~~~...

克隆基因的话，可以回收胶上的目的条带后连入载体，测序正确就没问题了。
赞一下 回复此楼
8楼2013-04-23 14:28:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangqi1107

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

既然是克隆基因，有目的带就回收，污染了模板也没关系的。引物重新稀释还污染，可能你用的水污染了模板。PCR重新拆封的都包括什么东西，如果有你以前用的东西，也可能污染。水也可能污染了。
赞一下 回复此楼
9楼2013-04-23 14:35:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
环境，水，稀释用的水或其他缓冲液也可能会污染的
既然只是用于克隆，只要有目的条带出现，割胶回收就可以了。
赞一下 回复此楼
你的日子如何，你的力量也必如何！
10楼2013-04-24 11:27:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sls19881024 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +4 西山十月 2026-08-09 6/300 2026-08-10 00:16 by liufeng0619
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +7 Lanmanbaby 2026-08-09 14/700 2026-08-09 23:33 by Tide man
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +15 且听虎啸 2026-08-07 22/1100 2026-08-09 22:13 by 布布和一二
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 21/1050 2026-08-09 17:21 by 天神眷顾
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭