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sls19881024

银虫 (小有名气)

[求助] 大家帮我看一张电泳图片~~~

大家帮我看一下这张图,第一泳道时maker2000,2、是正常扩增的,3和4是加入单引物的,5是加入双引物,没有模板的,这到底是哪个东西污染了?

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小松
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by sls19881024 at 2013-04-22 08:29:06
可是我把所有的东西都换了新的后,只是有一个引物没有换(没法换),又出现这样的情况了  ( 泳道同上)

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...

无模板对照P出条带,但与目标条带大小不同。可能是体系里污染了痕量其它来源的DNA,造成扩增。当加入正确的模板,P出理论片段。你做这个PCR的目的是什么?如果是克隆,只要能P出正确片段就可以了。
6楼2013-04-23 00:01:07
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流,期待你的精彩1 2013-04-22 08:50:40
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流,期待你的精彩1 2013-04-22 08:50:50
你要的是最上面的带吗?无模板P出带,说明PCR体系有模板污染。单引物P出带,说明体系里存在引物污染。
2楼2013-04-22 01:10:44
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sls19881024

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-22 01:10:44
你要的是最上面的带吗?无模板P出带,说明PCR体系有模板污染。单引物P出带,说明体系里存在引物污染。

可是我把所有的东西都换了新的后,只是有一个引物没有换(没法换),又出现这样的情况了  ( 泳道同上)

7~8IX{GKSG9DAM233BEPU%6.jpg

小松
3楼2013-04-22 08:29:06
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wangqi1107

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第二个泳道和第五个泳道加的东西一样吧?为什么条带大小不一样?三泳道单引物有条带,四泳道没有说明第三个泳道里的引物可能污染了模板!全部换完都怎么换的?具体点!说不定你换的东西仍然还有污染,所以要把具体信息发过来。
4楼2013-04-22 10:42:07
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