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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家帮我看一张电泳图片~~~
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sls19881024

银虫 (小有名气)

[求助] 大家帮我看一张电泳图片~~~

大家帮我看一下这张图，第一泳道时maker2000,2、是正常扩增的，3和4是加入单引物的，5是加入双引物，没有模板的，这到底是哪个东西污染了？

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小松
1楼 2013-04-21 20:44:04
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by sls19881024 at 2013-04-22 08:29:06
可是我把所有的东西都换了新的后，只是有一个引物没有换（没法换），又出现这样的情况了  （ 泳道同上）

7~8IX{GKSG9DAM233BEPU%6.jpg
...

无模板对照P出条带，但与目标条带大小不同。可能是体系里污染了痕量其它来源的DNA，造成扩增。当加入正确的模板，P出理论片段。你做这个PCR的目的是什么？如果是克隆，只要能P出正确片段就可以了。
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6楼2013-04-23 00:01:07
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-22 08:50:40
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-22 08:50:50
你要的是最上面的带吗？无模板P出带，说明PCR体系有模板污染。单引物P出带，说明体系里存在引物污染。
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2楼2013-04-22 01:10:44
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sls19881024

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-22 01:10:44
你要的是最上面的带吗？无模板P出带，说明PCR体系有模板污染。单引物P出带，说明体系里存在引物污染。

可是我把所有的东西都换了新的后，只是有一个引物没有换（没法换），又出现这样的情况了  （ 泳道同上）

7~8IX{GKSG9DAM233BEPU%6.jpg
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小松
3楼2013-04-22 08:29:06
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wangqi1107

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第二个泳道和第五个泳道加的东西一样吧？为什么条带大小不一样？三泳道单引物有条带，四泳道没有说明第三个泳道里的引物可能污染了模板！全部换完都怎么换的？具体点！说不定你换的东西仍然还有污染，所以要把具体信息发过来。
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4楼2013-04-22 10:42:07
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