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biofeixue

木虫 (著名写手)

[求助] 求大家帮我分析我的拟南芥叶RNA电泳图!

这是我提的拟南芥叶片中的RNA ,用的是Trizol试剂,谁能告诉我28s rRNA和18s rRNA分别是哪一条带,我用的是普通琼脂糖电泳(TBE不是新配),marker是5000的点了5微升。提的RNA也点了5微升。电泳条件为1%琼脂糖,150v,跑了17分钟。
另外我们这儿测OD的分光光度计坏了,我能不能通过什么方法粗略估算一下RNA含量,直接做反转录。我后再做的是半定量RT-PCR.
此外怎么可以看出来是DNA污染还是蛋白污染?
另外在用MBI K1622反转录时,还用不用纯化mRNA,能不能直接用总RNA转录?
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Morus

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
咸鱼(金币+2): 奖励有价值的应助帖~ 2011-05-08 20:16:50
biofeixue(金币+5): 2011-05-09 04:05:22
RNA电泳结果显示,28S条带明显不是18S的两倍,估计RNA有降解。
2楼2011-05-08 11:27:58
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biofeixue

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by Morus at 2011-05-08 11:27:58:
RNA电泳结果显示,28S条带明显不是18S的两倍,估计RNA有降解。

请明哪一条是28S哪一条是18s
3楼2011-05-09 07:45:20
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Morus

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

biofeixue(金币+5): 2011-05-10 05:12:13
biofeixue(金币+5): 2011-09-22 04:01:44
最上面那条是28S,紧接的那条是18S。
4楼2011-05-09 11:26:00
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yanixiaocao

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

biofeixue(金币+5): 2011-05-14 04:58:05
从大小判断,28S大小在5K左右,18S在1.8Kbb左右。
5楼2011-05-12 23:48:06
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