应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western实验中大分子量的蛋白如何鉴定
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 1390  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

415849841

银虫 (小有名气)

[求助] western实验中大分子量的蛋白如何鉴定

实验中有两个蛋白分子量分别是220kd和180kd，用β-actin做内参，配置8%的分离胶，但是从没有测出过这两个蛋白的表达，是不是内参和分离胶的浓度选错了，请高手指点一下，不胜感激。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-21 13:09:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-22 08:51:10
如果胶浓度不合适，只是分不开蛋白，不会检测不到。我觉得8%的胶应该是可以的。你确定样品中目标蛋白的量在western的检测限以上吗？
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-22 01:16:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

415849841

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-22 01:16:18
如果胶浓度不合适，只是分不开蛋白，不会检测不到。我觉得8%的胶应该是可以的。你确定样品中目标蛋白的量在western的检测限以上吗？

应该是吧，我们上样一般都在100微克，细胞都在50微克，不知道什么原因导致这样的问题出现

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-23 00:40:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 415849841 at 2013-04-23 00:40:41
应该是吧，我们上样一般都在100微克，细胞都在50微克，不知道什么原因导致这样的问题出现
...

根据你说的上样量，可以考染看看带型。内参的western做出来了吧？
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-23 01:48:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

415849841

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-23 01:48:20
根据你说的上样量，可以考染看看带型。内参的western做出来了吧？...

做出来了。你是说不转膜直接用考马斯亮蓝漂染，看出了哪些条带是吗？
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-23 12:36:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 415849841 at 2013-04-23 12:36:23
做出来了。你是说不转膜直接用考马斯亮蓝漂染，看出了哪些条带是吗？...

是的，直接染胶就行了。虽然转过膜液可以用考马斯亮蓝染色看转膜的效果。你可以看一下目标蛋白分子量范围的条带情况。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-04-23 14:27:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 415849841 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +4 Gymno 2026-03-30 4/200 2026-03-30 23:07 by ms629
[考研] 生物考研337分求调剂 +3 cgxin 2026-03-30 4/200 2026-03-30 23:00 by Evan_Liu
[考研] 抱歉 +4 田洪有 2026-03-30 4/200 2026-03-30 21:26 by mumin1990
[考研] 生物学学硕，一志愿湖南大学，初试成绩338 +7 YYYYYNNNNN 2026-03-26 9/450 2026-03-30 20:29 by YYYYYNNNNN
[考研] 一志愿华中师范化学332分求调剂 +3 Lyy930824@ 2026-03-29 3/150 2026-03-30 20:15 by DHUSHUAI
[考研] 抱歉 +3 田洪有 2026-03-30 3/150 2026-03-30 19:11 by 迷糊CCPs
[考研] 求调剂 +10 家佳佳佳佳佳 2026-03-29 10/500 2026-03-30 18:34 by 544594351
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +16 李李不服输 2026-03-26 16/800 2026-03-30 17:47 by wangjy2002
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +7 BBQ233 2026-03-30 7/350 2026-03-30 17:44 by oooqiao
[考研] 一志愿211，335分，0856，求调剂院校和导师 +7 倾____萧 2026-03-27 8/400 2026-03-30 09:37 by longlotian
[考研] 289求调剂 +5 BrightLL 2026-03-29 5/250 2026-03-29 17:24 by zhyzzh
[考研] 321求调剂 +7 璞玉~~ 2026-03-25 8/400 2026-03-29 06:41 by 544594351
[考研] 316求调剂 +7 江辞666 2026-03-26 7/350 2026-03-28 21:28 by sanrepian
[考研] 085701环境工程，267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 330一志愿中国海洋大学 化学工程 085602 有读博意愿 求调剂 +3 wywy.. 2026-03-27 4/200 2026-03-28 03:32 by fmesaito
[考研] 化学调剂 +4 爱吃番茄的旭 2026-03-24 5/250 2026-03-27 17:50 by kiokin
[考博] 26申博 +3 加油冲啊！ 2026-03-26 3/150 2026-03-27 15:38 by cls512
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭