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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 采用考马斯亮蓝法测蛋白酶活
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断翼的天使

金虫 (小有名气)

[交流] 采用考马斯亮蓝法测蛋白酶活已有7人参与

如果采用考马斯亮蓝法测蛋白酶活，测出吸光度后，如何计算酶活呢？
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1楼2013-04-12 00:10:42
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断翼的天使

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lishuelishue at 2013-04-12 21:39:25
你只能定量蛋白有多少啊，怎么能测定出酶活？就算是酶也是蛋白，但是你测出的也是酶量啊，不是酶活。、。。

蛋白酶酶活测定方法及原理
Protease activity assay method and principle
方法        原理
福林酚法        福林-酚试剂在碱性条件下可被酚类化合物还原呈蓝色钼蓝和钨蓝混合物，而蛋白质分子中有含酚基的氨基酸如酪氨酸、色氨酸等，可使蛋白质及其水解产物呈上述反应，利用此原理测定蛋白酶酶活。
考马斯亮蓝法        考马斯亮蓝染料与蛋白质在酸性条件下结合，主要是染料与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合，使染料的最大吸收峰的位置由465nm变为595nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色，在595nm下测定的吸光度值A595，与蛋白质浓度成正比。
按照这个最后可以得出蛋白含量，但是如何换算成酶活呢？
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9楼2013-04-16 16:51:06
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shiliu2011

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
此法是用来定量蛋白啊！单位当然是ug/ul  or mg/ml之类了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-04-12 02:28:30
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mada1986

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的蛋白酶也是蛋白啊 这个怎么测？
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3楼2013-04-12 10:48:37
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lishuelishue

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励交流！ 2013-04-12 23:22:26
你只能定量蛋白有多少啊，怎么能测定出酶活？就算是酶也是蛋白，但是你测出的也是酶量啊，不是酶活。、。。
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4楼2013-04-12 21:39:25
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