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马克王子

木虫 (小有名气)

[求助] 吸附剂吸附蛋白，用考马斯亮蓝法测定，总是吸附后的数值比吸附前还大，怎么回事啊？

吸附剂吸附蛋白，用考马斯亮蓝法和紫外吸收法，总是吸附后的数值比吸附前还大，怎么回事啊？
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1楼 2012-05-07 14:16:39
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宁孙涟漪

新虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
sweety: 应助指数-1, 无效应助 2012-05-09 10:08:42
弱弱的回答~选的吸附剂不会也是蛋白质类吸附剂吧~~其实我不太懂~嘻嘻
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2楼2012-05-07 15:29:16
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马克王子

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 宁孙涟漪 at 2012-05-07 15:29:16:
弱弱的回答~选的吸附剂不会也是蛋白质类吸附剂吧~~其实我不太懂~嘻嘻

不是，和蛋白质没有一点联系
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3楼2012-05-07 20:04:57
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libocpu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
吸附剂是大分子吗？会带电荷吗？有的吸附剂可能引起考马斯亮蓝的吸收光谱发生红移或蓝移，对蛋白质定量造成干扰。
先做个空白看看是否有干扰最理想。
如有干扰，建议换个方法测定。
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4楼2012-05-07 20:31:00
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sesame_oil

荣誉版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主
感谢参与，应助指数 +1
sweety: 应助指数-1, 无效应助 2012-05-09 10:08:20
建议换个方法测定，这个楼主可以试试
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不是哥不笑，一笑粉就掉
5楼2012-05-07 21:18:31
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dodogougou

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看看吸附后测定的溶液中是否引入了其他干扰物质。影响溶液蛋白质测定的因素很多，比如各种盐、表面活性剂等；另外如果溶液中引入了大量未除尽的颗粒，呈浑浊状引起光散射，对测定结果会有很大的干扰。

可以用没有蛋白质的空白溶液，看吸附剂的加入是否导致了光谱变化。
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6楼2012-05-08 09:25:58
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马克王子

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dodogougou at 2012-05-08 09:25:58:
看看吸附后测定的溶液中是否引入了其他干扰物质。影响溶液蛋白质测定的因素很多，比如各种盐、表面活性剂等；另外如果溶液中引入了大量未除尽的颗粒，呈浑浊状引起光散射，对测定结果会有很大的干扰。

可以用没 ...

参比也加入了吸附剂！可是还是不行哎！
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7楼2012-05-08 22:48:16
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dodogougou

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
hsd3521: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-24 09:51:02
引用回帖:
7楼: Originally posted by 马克王子 at 2012-05-08 22:48:16:
参比也加入了吸附剂！可是还是不行哎！

不是作参比，是作空白。有必要的话，可以扫一定波长范围内的吸收光谱图。

另外，在通过紫外-可见吸收光谱法定量测定样品浓度时，一定要注意样品浓度和标准曲线各点的浓度要在线性范围之内，否则是不符合朗伯-比尔定律的。
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8楼2012-05-09 13:31:01
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fgx0168888f

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-10-28 21:39:26
考马斯亮蓝法测定其光吸收值与蛋白质含量成正比。 出现你这种情况的原因可能是吸附剂的成分对溶液的吸光值产生了影响
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9楼2012-05-22 23:14:36
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橐橐22

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
hsd3521: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-28 21:39:44
有的吸附剂本身会“溶解”，产生吸收
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越是成功的人，受到的批评越多；只有那些什么也不干的人，才能免受批评。
10楼2012-10-28 19:33:02
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