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马克王子

木虫 (小有名气)

[求助] 吸附剂吸附蛋白,用考马斯亮蓝法测定,总是吸附后的数值比吸附前还大,怎么回事啊?

吸附剂吸附蛋白,用考马斯亮蓝法和紫外吸收法,总是吸附后的数值比吸附前还大,怎么回事啊?
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dodogougou

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看看吸附后测定的溶液中是否引入了其他干扰物质。影响溶液蛋白质测定的因素很多,比如各种盐、表面活性剂等;另外如果溶液中引入了大量未除尽的颗粒,呈浑浊状引起光散射,对测定结果会有很大的干扰。

可以用没有蛋白质的空白溶液,看吸附剂的加入是否导致了光谱变化。
6楼2012-05-08 09:25:58
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dodogougou

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


hsd3521: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-24 09:51:02
引用回帖:
7楼: Originally posted by 马克王子 at 2012-05-08 22:48:16:
参比也加入了吸附剂!可是还是不行哎!

不是作参比,是作空白。有必要的话,可以扫一定波长范围内的吸收光谱图。

另外,在通过紫外-可见吸收光谱法定量测定样品浓度时,一定要注意样品浓度和标准曲线各点的浓度要在线性范围之内,否则是不符合朗伯-比尔定律的。
8楼2012-05-09 13:31:01
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