| 查看: 569 | 回复: 1 | ||
[求助]
关于重组蛋白的表达
|
| 我做了个重组蛋白，不大，目的片段核苷酸才200bp，但是表达出来就是包涵体！我低温诱导过，没有表达。不知道是怎么了！我想问低温诱导菌的浓度多少比较合适，我是在比较浓的时候诱导的，16度过夜！而且包涵体我纯化，到洗的时候就是一坨一坨的，重悬不起来，都没什么效果！请大家指教一下，谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有179人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于重组表达纯化出的蛋白的酶活性问题
已经有9人回复
- 急！重组蛋白怎么突然不表达了？
已经有4人回复
- 带GFP的重组表达载体，GFP蛋白会不会影响目的基因表达的蛋白？
已经有20人回复
- 国内通过基因重组蛋白表达制取多肽公司如何
已经有6人回复
- 重组蛋白在大肠杆菌中的高效表达策略
已经有6人回复
- 求助！关于GST融合蛋白纯化！楼主愁得一夜没有睡好！
已经有20人回复
- pMAL载体表达重组蛋白
已经有14人回复
- 重组蛋白是包涵体怎么溶
已经有42人回复
- 蛋白激酶原核表达
已经有14人回复
- 重组蛋白含半胱氨酸纯化过程如何保护巯基
已经有14人回复
- 怎样把strep标签加到重组蛋白的C端
已经有3人回复
- 重组蛋白前面会不会有其他的氨基酸残基
已经有11人回复
- 求助：有谁做过关于绘制大肠杆菌生长曲线及检测二次生长现象的实验，想了解下～
已经有5人回复
- 大规模培养细菌或细胞，表达重组蛋白等的童靴可以进来看看哦
已经有13人回复
- 重组蛋白结合不到ni柱上
已经有24人回复
- 关于蛋白重组表达的问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】关于his-tagged 蛋白纯化
已经有9人回复
- 【求助/交流】重组蛋白融合标签的选择
已经有6人回复
- 【求助/交流】重组蛋白表达
已经有9人回复
- 【求助/交流】重组蛋白是红色的，怪事！
已经有22人回复
- 【求助】重组人蛋白抗体如何检测和检测意义
已经有3人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流应助 2013-04-07 17:22:32
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流应助 2013-04-07 17:22:32
|
低温下不表达有点奇怪.低温诱导和37C诱导没有操作上的区别,就是温度而已,因为让蛋白合成慢一点, suppose可以让蛋白有更多的时间去fold. 你去查查你的protein有没有cystine以及disulphide bond,如果有很多,不溶的问题庶几可救.否则就只能是变性的方法纯化了,6M urea 或者6M guanidine. after dialysis, some of the proteins may refold into the correct conformation, but a large portion will aggregate and precipitate |
2楼2013-04-07 15:13:04
