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山水88

木虫 (正式写手)


[交流] SDS-PAGE交流

最近做SDS-PAGE跑蛋白,样品经过压缩胶后也不能成一条线,看上去特别凌乱,最终图像时好时坏,老是不清晰,且特别扭曲,试剂重新配过了,求教下各位~
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爱上文慧

银虫 (小有名气)


★ ★
山水88(金币+1): 谢谢参与
古可ぷ: 金币+1, 鼓励交流 2013-03-31 19:41:50
你做胶的时候漏胶了吗?还有就是压不成一条线跟PH关系很大,虽然你重新配试剂了,但是可能PH是个疏漏
7楼2013-03-31 09:58:38
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hubinghello

金虫 (小有名气)



山水88(金币+1): 谢谢参与
在做表达,还没开始跑,关注中
3楼2013-03-30 21:25:41
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沉默的独角兽

金虫 (正式写手)



山水88(金币+1): 谢谢参与
配好后混匀没?
4楼2013-03-30 21:37:07
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robustli

银虫 (小有名气)


★ ★
山水88(金币+1): 谢谢参与
古可ぷ: 金币+1, 谢谢交流 2013-03-31 19:41:27
检查一下你浓缩胶和分离胶的PH值是否正确,另外浓缩胶不能太薄,否则跑出来得条带会很弥散,还有就是糖蛋白在跑SDS-PAGE时,条带也会经常弥散。
5楼2013-03-31 00:33:03
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beimi

木虫 (著名写手)


★ ★
山水88(金币+1): 谢谢参与
古可ぷ: 金币+1, 感谢交流 2013-03-31 19:41:39
我今天刚好碰到这个问题了,我查了下PH,有点低,然后调了下PH,用别人的试了一下,就好了,主要是PH的问题
6楼2013-03-31 04:30:04
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山水88

木虫 (正式写手)


引用回帖:
7楼: Originally posted by 爱上文慧 at 2013-03-31 09:58:38
你做胶的时候漏胶了吗?还有就是压不成一条线跟PH关系很大,虽然你重新配试剂了,但是可能PH是个疏漏

谢谢,重新调下试试
8楼2013-03-31 10:07:37
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山水88

木虫 (正式写手)


引用回帖:
6楼: Originally posted by beimi at 2013-03-31 04:30:04
我今天刚好碰到这个问题了,我查了下PH,有点低,然后调了下PH,用别人的试了一下,就好了,主要是PH的问题

好像师姐做时专门调了出不是很好
9楼2013-03-31 10:08:05
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山水88

木虫 (正式写手)


引用回帖:
4楼: Originally posted by 沉默的独角兽 at 2013-03-30 21:37:07
配好后混匀没?

混匀了的
10楼2013-03-31 10:08:50
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emosgaogao

金虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
山水88(金币+1): 谢谢参与
古可ぷ: 金币+3, 谢谢交流 2013-03-31 19:42:09
极有可能是浓缩胶和分离胶的PH值,当然和样品的上样量也有一定的关系,上样量不宜过多
漏胶和没有混匀也会出现这种情况
另外如果你的胶浓度比较大的话,溴酚蓝是会曾呈现比较粗,或不是特别直,这到时影响不大。
11楼2013-03-31 18:28:18
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lzhao216

铁虫 (小有名气)



山水88(金币+1): 谢谢参与
建议浓缩胶稍微多点,电泳时电压低点试试。另外,如果可以,可以买点预制胶试试。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
13楼2013-04-01 11:34:39
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shaozhenjun

木虫 (小有名气)



山水88(金币+1): 谢谢参与
胶现配现用,而且AP和TEMED不能加太多哈,特别是这会天气开始热的时候
14楼2013-04-01 16:08:35
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简单回复
2013-03-30 18:41   回复  
山水88(金币+1): 谢谢参与
haixiawu12楼
2013-04-01 11:33   回复  
山水88(金币+1): 谢谢参与
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