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马龙sweeting

木虫 (正式写手)


[交流] western blot没有结果是怎么回事~~

自己摸索着做western,但是做了3次western blot没有结果,也不知道是哪里有问题,换用别人的抗体也不行,我做western是菜鸟,也不知道究竟哪里出了问题,请各位老手能够提出一些我可能出问题的地方,不胜感激~~
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concon123456

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
二抗用了免荧光的!
7楼2013-03-21 09:57:23
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查看全部 13 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)



马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
如果你用别人的抗体也不行,说明问题可能是胶、转膜或者是后面的detection。胶跑得怎么样?上样多少,是否染胶观察?此外,膜转得怎么样?有预染marker吗?一抗、二抗是否都好用。用什么检测?是曝光film吗?
4楼2013-03-20 04:04:22
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robustli

银虫 (小有名气)



马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
the best way to test your system is using a positive control.
5楼2013-03-20 04:11:33
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myfinalway

木虫 (正式写手)



马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
WB 步骤多,每一步都有可能影响,你要一个一个排除。
6楼2013-03-20 09:54:22
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