版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

田甜思

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 66
帖子: 46
在线: 6.8小时
虫号: 1847970
注册: 2012-06-05
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] pET-30a(+)不表达

一直在做pET-30a(+)这个载体，但是不表达，我是在37度下培养的，都是在OD600=0.6-0.7之间加IPTG的，但就是不表达，质粒测序是正确的。各位帮忙解决下。谢谢！

» 猜你喜欢

胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有101人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复
推荐一些基础有机化学的实验教程已经有0人回复
探秘高分子世界：链动微观，筑就材料新篇已经有0人回复
科研赋能时尚宠物：检测护航，焕新养宠体验已经有0人回复
精测粗蛋白：以科研标尺，守品质核心已经有0人回复
解码碳水世界：科研探秘，赋能营养与应用已经有0人回复
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石已经有0人回复
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

蛋白表达不出来是怎么回事？已经有12人回复
PET-30a 双酶切已经有4人回复
毕赤酵母表达一直不表达已经有13人回复
蛋白表达可不可能存在内含肽剪接已经有7人回复
目的蛋白序列连接pet15b测序结果正确为何不表达已经有7人回复
蛋白表达不明确，但是连菌体蛋白都不见已经有9人回复
用过pET28a(+)表达载体的高人请指教已经有31人回复
含信号肽的序列能否在原核表达系统PET-32a中表达已经有7人回复
急！蛋白截短表达不成功~ 已经有8人回复
融合蛋白在不同细胞系表达已经有4人回复
【求助/交流】表达载体pCAMBIA1304表达顺序看不懂已经有12人回复
关于蛋白表达的问题已经有3人回复
原核表达系统不表达目的蛋白已经有8人回复
膜蛋白表达问题已经有15人回复
【求助/交流】（引物设计）怎么防止pET28a中Nco1的ATG影响目的基因的表达？已经有9人回复
【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带已经有41人回复
【求助/交流】pET21转不进BL21 什么原因？已经有9人回复
【求助/交流】连接表达载体PET-28A失败原因已经有23人回复

1楼2013-03-12 20:40:31

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lihuahan

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 314.8
帖子: 44
在线: 41小时
虫号: 2795325
注册: 2013-11-12
性别: MM
专业: 食品科学基础

引用回帖:

10楼: Originally posted by dhmdddd at 2013-03-14 21:55:11
阅读框不会有问题吧?可以考虑把诱导的温度改变下,多做几个温度,我们实验室就遇到常用的表达条件不表达,(25℃,0.4mM IPTG),提高温度后就有目的蛋白了

请问一下你说的阅读框是目的基因的阅读框吧？在做原核表达的时候，我知道基因的CDS序列，怎么找它的阅读框尼？设计两端带有酶切位点的引物是根据阅读框设计吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

17楼2014-04-30 20:18:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主田甜思的主题更新