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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 微生物发酵放大实验要注意哪些问题，小瓶转大瓶或者发酵罐
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包子飞扬

铜虫 (小有名气)

[交流] 微生物发酵放大实验要注意哪些问题，小瓶转大瓶或者发酵罐

各位大虾，本人摸索好了250ml小瓶的发酵条件，如果我想用1000ml的大瓶发酵或者是想上发酵罐，我的这些发酵条件要有怎么样的变化呢？请有经验的大虾们多多指教。
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1楼2013-02-26 13:12:48
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wentanbaodao

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
包子飞扬(金币+1): 谢谢参与
zhangxingc: 金币+5, 交流很有价值，鼓励鼓励 2013-02-27 12:58:05
穷孩子，发酵罐和摇瓶相差太大，因为整体的机制不甚相同，我觉得最大的区别在于
1 摇瓶靠的是离心力，而发酵罐是真正的剪切，有些菌种在摇瓶中生长良好，但到发酵罐上由于剪切作用而无法结团，所以很多时候两者是不一样的。
2 溶氧问题：上面几位说得很全了，我就不多说了
3 补料问题：我看楼主MM好像是学微生物的，很多微生物发酵都需要用到前体，而且是流加式的，你在摇瓶上无法实现持续流加吧，但是发酵罐是可以的。
4 环境稳定问题：有些菌种，是需要维持恒定的pH来保持发酵进行的，摇瓶中我们无法监测到（但是现在已经出现直接跟着检测系统的摇瓶系统），所以你无法维持一个恒定的pH。发酵罐可以通过在线控制pH值恒定
5 数据：你做发酵，最重要的是得到合适的配方与工艺吧，往往在发酵罐上可以比较全地反映出你的整个发酵状态，什么时间菌体疯狂生长，什么时间进入产素阶段，根据一些指标可以看得出来，所以摇瓶只是表层，发酵罐才是深层，

  总之吧，摇瓶肯定是基础，只有在摇瓶的基础上进行系统的发酵罐的研究才能真正适合生产。再者，你就是由小罐到大罐的工艺操作还是不尽相同。
    仅供参考，大家多交流！
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10楼2013-02-27 10:46:55
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普通回帖

zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)
★
包子飞扬(金币+1): 谢谢参与
那就按小瓶的条件做，达不到要求再调试
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2楼2013-02-26 13:28:41
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匿名

用户注销 (知名作家)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
包子飞扬(金币+1): 谢谢参与
zhangxingc: 金币+3, 回贴有价值，鼓励交流 2013-02-26 15:05:40
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励交流！ 2013-02-26 15:12:49
本帖仅楼主可见
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5楼2013-02-26 13:37:25
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考拉003

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
包子飞扬(金币+1): 谢谢参与
zhangxingc: 金币+6, 鼓励新虫回帖交流，回帖有价值 2013-02-26 15:06:35
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励新虫应助！ 2013-02-26 15:12:36
从菌种习性来说，250ml和1000毫升甚至更大的罐发酵，其物理条件相差不大，比如最适培养温度，培养基浓度，PH等。大罐发酵要考虑到溶解氧，这就要注意大罐的搅拌转速，风量和压力；1000ml瓶子可以考虑培养基少一些，增加氧含量。大罐发酵也要考虑到影响产物的最大比生成速率的因素，比如菌体生长最适温度和积累产物最适温度不一，最适PH也有不一的，这个就要多批次实验调整，找出最佳发酵条件。
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6楼2013-02-26 13:40:39
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zhuqp

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
包子飞扬(金币+1): 谢谢参与
zhang8826857: 金币+3, 新虫加油 2013-02-26 16:46:54
注意温度、搅拌、溶氧、pH值，先按比例放大后摸索条件，发酵罐可增加补料过程。
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7楼2013-02-26 16:35:50
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QQ614919066

铜虫 (小有名气)
★
包子飞扬(金币+1): 谢谢参与
上不起发酵罐的孩子啊。。。。
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9楼2013-02-27 10:08:02
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foolmonkey

新虫 (知名作家)
★
包子飞扬(金币+1): 谢谢参与
微生物发酵的放大实验，要注意反应罐的培养温度，培养基浓度，PH值，搅拌转速，还要不断的反应罐增加补料。
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11楼2013-02-27 11:13:08
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liuyouting

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
大瓶子的时候先按小瓶子的条件来做~做的过程中慢慢调节到最适条件，大瓶子的条件跟小瓶子的条件基本不会变化太多！
上罐的条件可以先按大瓶子的最好的条件做，然后再摸索~一般上罐条件会跟瓶子的条件有较大差别，因为摇瓶溶氧没法控制，为上罐溶氧及pH都可以监测控制！
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12楼2013-02-28 09:15:35
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柠檬91741

铜虫 (小有名气)
重复，总结！
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13楼2013-03-13 10:01:28
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lingling安农

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
发酵罐是工业生产，先用摇床做小实验，在上发酵罐，实验室师兄也这么做的
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14楼2013-03-14 14:40:14
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潘瑞冬冬

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
从250ml的摇瓶到发酵罐需要循序渐进，一级种子为250ml摇瓶，培养一段时间后转接入1L摇瓶中作为二级种子，再培养若干小时后才能接入发酵罐放大发酵。一级种子和二级种子培养条件基本相同，看自己是否要加诱导剂，上罐发酵的pH应该都是药瓶中摸索的最适值，其他的条件根据菌种不同有差异，再看你是否补料了。呵呵

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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15楼2013-03-14 22:29:25
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egdxgo

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
上发酵罐先按小瓶子工艺来，然后慢慢摸条件。前几次做建议以熟悉发酵罐和整个操作为主，做个批培养就ok。觉得对罐子有感觉了再上补料或者优化，喜欢怎么玩怎么玩。ps女生做罐子有点累的。
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16楼2013-03-16 20:30:41
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未来的海888

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
对高浓度酒精发酵来说的话，溶氧量是一个很关键的问题，因为厌氧发酵前期的话酵母会由于底物浓度过高而生长缓慢，后期酵母活力严重下降，致使残糖量较高，如果通氧的话，酵母生长很加快，酵母活力会保持较长时间，但是溶氧量太大会使酒精产量降低，毕竟酵母是兼性厌氧性微生物，所以通氧的体积和时间也要把握好才能使发酵产物提高产量！！！
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17楼2014-07-06 23:49:32
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树2979

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
那就直接上罐，不需要用大瓶子了！按照你摇瓶的最优条件在灌上试一试，看看溶氧，pH是如何变化的？改变转速和通气量又会有什么影响，定时取样做全检，看看菌种的理化性能有什么规律可循，最终的效价怎么样？通过以上的摸索得出的结果再慢慢调整各种因素直到你的理想要求！总之放大是一个漫长的过程，要有耐心，花几个月好好做吧

[ 发自小木虫客户端 ]
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18楼2014-07-07 08:35:21
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yu71443楼
2013-02-26 13:34   回复  
包子飞扬(金币+1): 谢谢参与
偶尔呆4楼
2013-02-26 13:34   回复  
包子飞扬(金币+1): 谢谢参与
1个
yingying15888楼
2013-02-26 20:36   回复  
包子飞扬(金币+1): 谢谢参与
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