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dqf256196

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于发酵罐染菌 已有1人参与

问题描述:15L发酵罐染菌  即使单纯的培养基灭菌后,没有任何其他操作,跑空白也会染菌
   1.灭菌之前保压实验24h 2公斤压力降至1公斤 设备验漏找不到泄露的部位,即便如此按照厂家的说明书,保压是合格的(厂家的标准是1h内降低不超过0.01公斤)

  2.滤芯是新的,赛多利斯,使用之前验过符合标准(泡点实验)补充曾更换两次新的滤芯,依然染菌。

  3.灭菌后在未通入空气前取样于摇瓶中,培养之未见染菌
  已做过7~8罐,情况类似,都在运行一天后染菌现象开始显现,实在找不到原因了,各位有什么建设性意见,指导一下,先行谢过
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jingg1990

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab: 金币+5, MicEPI+1, 谢谢交流 2013-03-05 13:22:20
首先看染菌菌型是否多变或是多个菌型,如果多变或是多个菌型,空气系统、渗漏、降温系统、补料系统、搅拌密封等多加检查,如果单一菌型,优先考虑罐内有死角,这个要从罐内的设施来判断,尤其是罐内有无设计或制作过程中产生的夹层或空心部分,也可以在罐内加满水,按实消操作加温煮沸,两小时后升温至126-128度,维持两个小时,关进排气阀闷罐,第二天重复操作,第三天放水后接着进培养基消毒空白培养,看是否染菌或染菌开始时间有无延长,即可判断是否死角的问题。
27楼2013-03-05 13:19:47
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zch79214

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2013-01-06 22:47:42
一.跑空都染菌,肯定不是菌种问题;
二  应该是发酵罐的问题:
   建议1 检查设备渗漏,
       2 实消后别通气,如果染菌,那就是管道问题。(管道渗漏导致染菌)
       3 实消后未通气,也为染菌,反之通气,如果染菌肯定就是通气系统问题。
13楼2013-01-05 17:41:52
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普通回帖

tianhome

木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-01-05 18:56:15
非常理解你的痛苦,建议不接种运行一下,要有培养基。如果不染菌,说明种子有问题,如果染菌说明灭菌或通气系统有问题。
虫洞
2楼2013-01-05 03:38:57
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2013-01-06 22:47:50
是污染了什么菌呢?如果能排除种子的问题,有时候发酵罐生锈的地方容易藏菌,可以把发酵罐不发培养基高压空灭一次;如果还不保险就按除芽孢的方法试试。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-01-05 08:06:47
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oldflying

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2013-02-28 23:42:56
两种可能:1、种子已经被污染了;2、发酵罐的通气管道被污染了。可以加入培养基但不接种验证一下。
一个人的努力和坚持!
4楼2013-01-05 08:34:06
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amaoni

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2013-01-06 22:47:58
"灭菌之前保压实验24h 2公斤压力降至1公斤 设备验漏找不到泄露的部位,即便如此按照厂家的说明书,保压是合格的(厂家的标准是1h内降低不超过0.01公斤)"?
一天以后开始染菌,应该不会是过滤空气的问题,若培养基也染菌的话,不是种液的问题,应该是发酵罐的原因。
5楼2013-01-05 08:39:30
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dqf256196

新虫 (初入文坛)

我们也怀疑是发酵管的原因,可是找不到具体的点,依旧是解决不了 。
6楼2013-01-05 09:14:07
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dqf256196

新虫 (初入文坛)

问题描述:15L发酵罐染菌  即使单纯的培养基灭菌后,没有任何其他操作,跑空白也会染菌
  问题描述已经讲只是灭菌培养基,跑空白 没有任何其他操作   但是依然谢谢各位的热心
7楼2013-01-05 09:17:59
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love2412

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2013-01-06 22:48:05
跑空白染菌问题很可能出在发酵罐上。检查下各个阀门动作是否正常。排空管路不畅(尤其是在线灭菌后)容易造成液、气倒灌,甚至反向冲开滤芯,造成污染。
另外染的是芽孢吗?发酵罐管路环境比较恶劣,芽孢菌相对易存活。
8楼2013-01-05 09:48:58
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dqf256196

新虫 (初入文坛)

那个有单向阀 再者 更换新的滤芯都没有解决问题,染得菌不晓得是什么菌,反正每次从菌落表观来看和相似
9楼2013-01-05 10:02:09
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2013-01-06 22:48:12
建议将发酵罐拆开,彻底清洗一遍,尤其是密封圈等连接处,然后再空消--实消--空白培养。

如果还是污染,建议将杂菌进行鉴定,再分析原因
IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
10楼2013-01-05 10:39:04
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